拉曼光谱仪
分子能级与分子光谱分子运动包括整体的平动、转动、振动及电子的运动。分子总能量可近似为这些运动的能量之和,分别是分子的平动能、振动能、转动能和电子运动能。除平动能外,其余三项都是化的,统称分子内部运动能。分子光谱产生于分子内部运动状态的改变。3、检查所有软件窗口的设置是否正确检查拉曼光谱仪成像区域,设置窗口的数值并保证激光像点处于该区域的中心。分子有不同的电
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拉曼光谱仪
分子能级与分子光谱分子运动包括整体的平动、转动、振动及电子的运动。分子总能量可近似为这些运动的能量之和,分别是分子的平动能、振动能、转动能和电子运动能。除平动能外,其余三项都是化的,统称分子内部运动能。分子光谱产生于分子内部运动状态的改变。3、检查所有软件窗口的设置是否正确检查拉曼光谱仪成像区域,设置窗口的数值并保证激光像点处于该区域的中心。分子有不同的电子能级,每个电子能级又有不同的振动能级。而每个振动能级又有不同的转动能级。一定波长的电磁波作用于分子,引起分子相应能级的跃迁,产生分子吸收光谱。引起分子电子能级跃迁的光谱称电子吸收光谱,其波长位于紫外-可见光区,故称紫外-可见光谱。电子能级跃迁伴有振动能级和转动能级的跃迁,引起分子振动能级跃迁的光谱称振动光谱,振动能级跃迁的同时伴有转动能级的跃迁。红外吸收和拉曼散射光谱是分子的振动-转动光谱。用远红外光波照射分子时,只会引起分子中转动能级的跃迁,得到纯转动光谱。近红外区伴随的是X-H或多键振动的倍频和合频。
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激光拉曼光谱仪的原理
工作原理 激光拉曼光谱仪一定波长的电磁波作用于被研究物质的分子,引起分子相应能级的跃迁,产生分子吸收光谱。引起分子电子能级跃迁的光谱称电子吸收光谱,其波长位于紫外~可见光区,故称紫外-可见光谱。电子能级跃迁的同时伴有振动能级和转动能级的跃迁。此外,荧光X射线的强度与相应元素的含量有一定的关系,据此,可以进行元素定量分析。引起分子振动能级跃迁的光谱称振动光谱,振动能级跃迁的同时伴有转动能级的跃迁。拉曼散射光谱是分子的振动-转动光谱。用远红外光波照射分子时,只会引起分子中转动能级的跃迁,得到纯转动光谱。 拉曼光谱法是研究化合物分子受光照射后所产生的散射,散射光与入射光能级差和化合物振动频率、转动频率的关系的分析方法。 与红外光谱类似,拉曼光谱是一种振动光谱技术。所不同的是,前者与分子振动时偶极矩变化相关,而拉曼效应则是分子极化率改变的结果,被测量的是非弹性的散射辐。
拉曼光谱在生物学研究中的应用
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拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段,由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单,故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。
生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多宝贵的信息:
(1)蛋白质二级结构:α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转
(2)蛋白质主链构像:酰胺Ⅰ、Ⅲ,C-C、C-N伸缩振动
(3)蛋白质侧链构像:丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的侧链和后二者的构像及存在形式随其微环境的变化
(4)对构像变化敏感的羧基、巯基、S-S、C-S构像变化
(5)生物膜的脂肪酸碳氢链旋转异构现象。
(6)DNA分子结构以及和DNA与其他分子间的作用。
(7)研究脂类和生物膜的相互作用、结构、组分等。
(8)对生物膜中蛋白质与脂质相互作用提供重要信息。

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