结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,进行间接ELISA测定抗0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13.0版)进行t检验,统计结果差异极显著(P(0.001)。
二
3周标准鼠单抗
结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,进行间接ELISA测定抗0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13.0版)进行t检验,统计结果差异极显著(P(0.001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7~10 d可见孔内杂交瘤细胞生长,当细胞融合成片达孔底面积的35%~50%时,用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短,但获得的抗0体效价更高。
美国出版协会(AAP)于1998年创建了DOI以来,制定了标准,并建立了相应的解析系统,目前在出版界得到了广泛和成功的应用。DOI已用于期刊、电子书、技术报告、标准等各种文献类型的标识,并向与文献相关的科学数据、版权、甚至作者标识等多元化方向发展。截止2008年4月底,DOI的注册量已超过了3,000多万个,应用DOI的出版社和学会有2,500多家,图书馆1,300多个。万方数据公司已获得了在注册DOI代理机构权。
使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg;
(2)亚单位蛋白抗原每针次1-10μg;
(3)免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg;
(4)肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。
2. 37oC水浴中解冻佐剂,充分混匀,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1混匀。
3. 通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0注射免0疫小鼠,每只小鼠注射100μl。
4. 第7天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次免0疫佐剂和抗原现配现用
5. 第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+ TH1和/或CD8+ CTL反应。

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