冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之。
DMSO应为试剂级等级,无菌且无色是直接购
200-074-401冻存袋代理
冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之。
DMSO应为试剂级等级,无菌且无色是直接购买无菌产品,以5~10m1小体积分装,4℃避光保存,勿作多次解冻。
3.冻存细胞数量要足够。无论再怎么小心,细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以,一开始冻存细胞的数量要足够。一般要达到5× 10^6 /毫升,一瓶不够两瓶凑。但是,这个不能一概而论。有些细胞,比如杂交瘤细胞,只需要1-3x 10^6 /毫升
冻存袋的背景知识
采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。
冻存袋的使用注意事项
1. 如用液氮罐存放样品,包裹组织的铝箔或冷冻保存管转入样本袋时,请按以下步骤进行:把样本袋(纱布袋等)放入液氮中冷冻一下,而后将液氮冷却的组织放入样本袋
2. 如用广口容器液氮暂存,建议用进口高质量冻存管,油性笔标记后,样品迅速放入管中,拧紧后迅速放入液氮中。然后再转移到超低温冰箱中保存。
3.直接干冰中保存并邮寄的,建议全部用进口冻存管,油性笔标记后,样品迅速放入经干冰预冷的冻存管中,放入样品袋,埋入干冰中,密封包装后,运输。
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