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QuickShuttle-Basic来电咨询「在线咨询」

转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转0基因和基因表达的重要工具,而且是基因治0疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高0效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、经济。 转染试剂简介: 其中病毒载体的特点是整和效0率高, 可使外源基因
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转染(transfection)指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA转染技术的发展对现代分子生物学产生了巨大的影响。基因转染技术不仅是研究转0基因和基因表达的重要工具,而且是基因治0疗的关键步骤。理想的基因转染试剂应该具有如下特点:高0效转染;安全;低细胞毒性;方法简单;省时、经济。



转染试剂简介:

其中病毒载体的特点是整和效0率高, 可使外源基因在宿主细胞中长期表达,缺点是存在潜在的安全危险性。电穿孔法及显微注射法的特点是转染率较高,缺点是需要昂贵的仪器,前者对细胞的损伤较大,后者在导入DNA 时需要一个细胞一个细胞地注射,不适合大量细胞研究的需要。

人们一直在寻找更有效、毒性小同时对研究影响也小的转染试剂。由于脂质类转染试剂对细胞的毒性是由其脂质特性决定的,众多的研究者和生物公司将新一代转染试剂的开发聚焦在非脂质体的聚合物上,并已有一些优0秀的试剂产品上市。



使用方法:

1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中,每孔 5~10×104细胞,1ml 完全培养基。备注:如果筛选抗药性稳定细胞系,可以考虑简化的实验步骤,即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。

2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染试剂的zui适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。

3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。







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