冻存袋注意事项
可用于细胞在-196℃液氮中的存储和转运。所有冻存袋都是无菌即用型包装。冻存袋对于大量细胞的冻存非常方便,但使用过程中还有些小地方需要注意。较大冻存体积的推荐是参照冻存袋平放,液体厚度8mm时液体的体积。增加冻存液体的量,冻存袋到是能装下,但细胞复苏的时候就麻烦了,液体厚度太大,融化所需时间太长,细胞活率要受很大的影响啊!
冻存袋使用需要
CS250冻存袋价格
冻存袋注意事项
可用于细胞在-196℃液氮中的存储和转运。所有冻存袋都是无菌即用型包装。冻存袋对于大量细胞的冻存非常方便,但使用过程中还有些小地方需要注意。较大冻存体积的推荐是参照冻存袋平放,液体厚度8mm时液体的体积。增加冻存液体的量,冻存袋到是能装下,但细胞复苏的时候就麻烦了,液体厚度太大,融化所需时间太长,细胞活率要受很大的影响啊!
冻存袋使用需要注意?
1、操作冻存袋复苏,全程使用安全防护设备,建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下,请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季,请格外小心。
2、冻存细胞储存过程中,冻存袋的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生,冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存袋受损。
细胞冻存的原理
在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞。如向培养液加入保护剂,可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在-130℃以下的低温中能减少冰晶的形成。细胞复苏时速度要快,使之迅速通过细胞易受损的-5~0℃,细胞仍能生长,活力受损不大。
细胞冻存袋操作需要注意?
1.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
2.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。
3.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响 细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是 10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
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