冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之。
DMSO应为试剂级等级,无菌且无色是直接购
CS250冻存袋代理
冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之。
DMSO应为试剂级等级,无菌且无色是直接购买无菌产品,以5~10m1小体积分装,4℃避光保存,勿作多次解冻。
3.冻存细胞数量要足够。无论再怎么小心,细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以,一开始冻存细胞的数量要足够。一般要达到5× 10^6 /毫升,一瓶不够两瓶凑。但是,这个不能一概而论。有些细胞,比如杂交瘤细胞,只需要1-3x 10^6 /毫升
冻存袋介绍
细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。连续培养的细胞系容易发生遗传漂变,有限细胞系终会发生衰老,所有培养的细胞都易受到微生物污染。已建立的细胞系是一种宝贵资源,更换细胞系成本高昂,而且耗费时间。可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。
冻存袋的背景知识
采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。
使用冻存袋的方法
复苏细胞应采用融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但好为对数生长期细胞。在冻存天好换一次培养液;将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免;
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