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纳微 Protein A亲和层析介质
今天,国内企业普遍认识到我们应当以技术和产业化发展来针对国外垄断的众多关键技术领域进行突围,把高科技自主可控的主动权和企业命脉牢牢掌握在自己手里,才能一劳永逸地解决“卡脖子”的问题。十多年如一日的科研攻关自主,终成就了自身在纳米微球制造方面的隐形冠FFFFFF;">i军
东曹TOYOPEARL 疏水层析填料价格
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视频作者:北京慧德易科技有限责任公司
纳微 Protein A亲和层析介质
今天,国内企业普遍认识到我们应当以技术和产业化发展来针对国外垄断的众多关键技术领域进行突围,把高科技自主可控的主动权和企业命脉牢牢掌握在自己手里,才能一劳永逸地解决“卡脖子”的问题。十多年如一日的科研攻关自主,终成就了自身在纳米微球制造方面的隐形冠i军,应该是值得国人为之骄傲和自豪的成就,
五大类层析技术
-凝胶过滤(GF)
-离子交换(IEX)
-亲和层析(AC)
-疏水层析(HIC)
-反相层析(RPC)
基架–颗粒越细、大小越均匀,分辨率越高,但反压亦较高(SOURCE基架例外)
物理稳定性–新一代介质较坚固,能承受高流速,同时保持柱床体积和结构稳定,省却每次重新装柱,提高重复性化学稳定性-新一代介质能承受pH,高盐度,促溶剂和,利于开发分离条件和在位清洗(CIP),大大延长介质寿命并提高重复性
亲和层析
配体偶联在介质上,纯化能与配体结合的生物分子;通常一步便能得到高纯的样品;配体的特异性越强,所获产品纯度越高用亲和介质提纯单抗非常方便,以重组蛋白A的载量高;蛋白G则能结合更多不同源的IgG
金属鳌合介质(Chelating Sepharose Fast Flow)可反复鳌合不同金属,再用已结合依赖不同金属的蛋白,一种介质可做多种纯化工作
其他常用配体包括:肝素-纯化.酶III,凝血因子脂酶等Cibacron Blue(颜料)-纯化白蛋白,干扰素等外源凝集素如球蛋白A-多糖,糖蛋白等Glutathione谷胱甘三肽-重组融合蛋白等等.
可自行把所需配体偶联到活化偶联介质,的是NHS activated 4 Fast Flow和CNBr activated 4 FF;要注意化学基好不会参与配体和被纯化生物分子的结合作用中
层析填料寿命衰减的影响因素
样品状态
a.样品澄清度:样品越澄清对填料的寿命衰减影响越小。
b.样品粘度:样品的粘度越小,对填料寿命的影响越小。
c.样品酸碱度:过酸过碱都会加速填料寿命的衰减。
d.样品离子强度:离子强度越高填料寿命衰减的越快。
e.样品成分组成:样品成分越复杂,层析过程越复杂,填料的寿命衰减越快(这也与填料所处的工艺阶段吻合,捕获粗纯阶段填料寿命衰减的更快,精纯阶段填料寿命衰减的慢。)
层析工艺
a.柱床高度,流速及反压越大,工艺过程填料受到的外力就会增大,填