DNA连接酶与DNA聚合酶用途不同
DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆1菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。
DNA聚合酶在DNA copy中起做用，主要是连接DNA部分片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
激酶、磷酸酶、磷酸化酶
cDNA文库构建
DNA连接酶与DNA聚合酶用途不同
DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆1菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。
DNA聚合酶在DNA copy中起做用，主要是连接DNA部分片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
激酶、磷酸酶、磷酸化酶的区别？
激酶催化磷酸基团转移反应，比如己糖激酶。
磷酸酶催化磷酸基团的水解，与激酶正好相反。
磷酸化酶催化磷酸解反应，比如糖原磷酸化酶，催化糖原生成磷酸葡萄糖。这其实是磷酸解，要是水解就生成葡萄糖了。当然一般习惯上还是说水解。
激酶催化的反应一般也叫磷酸化，这没什么错误，只是和磷酸化酶容易混淆。
T4 RNA连接酶
用途：用RNA 3'末端标记；RNA和RNA分子间连接；寡核苷酸的环化；tRNA修饰；5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链；在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。
来源：由大肠杆1菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：37℃30分钟内，催化1 nmol 5'-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：50mM Tris-HCl(pH7.5)，10mM MgCl2，10mM DTT，1mM ATP，10μM 5'-[P]-(A)12-18(10μM in 5'-termini)。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷1酸酯酶。
酶储存溶液：10mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，50mM KCl，0.1mM EDTA，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃)，100mM MgCl2，100mM DTT。
遗传控制中大的困难并不是DNA的，而是需要被的特异DNA段的分离 。如果以基因为目的，特异DNA段的分离将大大有助于获得与遗传信息同样多的相关的基因产物，一般说这些基因产物均为蛋白质多肽，因此抗该蛋白质的对于测定和沉淀蛋白质及其前体有重要用途，甚至可用于了解蛋白质分子量 。AMV反转录酶和MLV反转录酶都必须有引物来起始DNA的合成。cDNA合成的引物是与真核细胞mRNA分子3’端poly（A）结合的12～18个核苷酸长的oligo（dT）。
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