通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。
备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
第21天按同样方式加强免0疫1针。
备注:每次佐剂和抗原现配现用。
第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按
弗氏不完全佐剂
通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠(视频),每只小鼠注射100μl。
备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
第21天按同样方式加强免0疫1针。
备注:每次佐剂和抗原现配现用。
第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000-1:10000000范围内,随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免0疫和脾细胞融合。
QuickAntibody系列免0疫佐剂有哪些特点?
与常规使用的弗氏佐剂相比,QuickAntibody免0疫佐剂具有免0疫周期短、针次少、无需乳化、抗原用量低、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、易获得构象型表位的抗0体等多方面优点,详述如下:
1. QuickAntibody只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,与弗氏佐剂相比可减少免0疫针次。
2. QuickAntibody通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-50μg(通常为小鼠5-20μg,
兔子20-50μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-10μg(通常为小鼠1-5μg ,兔子5-10μg)。
结 果
一、两种免0疫方式小鼠血0清效价比较
对两组试验动物在完成了基础免0疫后,尾静脉采集少量血液,分离血0清,进行间接ELISA测定抗0体效价,检测结果见图1。由图中数据可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0体效价即达到1:104。两组数据经生物学统计软件SPSS(Windows 13.0版)进行t检验,统计结果差异极显著(P(0.001)。
二、两种免0疫方式小鼠融合率比较
在细胞融合后约7~10 d可见孔内杂交瘤细胞生长,当细胞融合成片达孔底面积的35%~50%时,用ELISA检测特异性抗0体。两组免0疫小鼠细胞著。改良法耗费时间短,但获得的抗0体效价更高。
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