农杆1菌转化法在植物遗传转化中的应用：过去认为受农bacillus宿主范围限制，农bacillus介导的遗传转化只限于双子叶植物。1987年Grimsly首先将玉米条斑病毒的cDNA克1隆至质粒上，用农bacillus侵染的方法将玉米条斑病毒的cDNA导入玉米，使植株表现了系统感1染症状。这个报道有力地证明了农bacillus能够侵染玉米这种单子叶植物。随着载体系统和转
腺病毒载体
农杆1菌转化法在植物遗传转化中的应用：过去认为受农
bacillus
宿主范围限制，农bacillus介导的遗传转化只限于双子叶植物。1987年Grimsly首先将玉米条斑病毒的cDNA克1隆至质粒上，用农bacillus侵染的方法将玉米条斑病毒的cDNA导入玉米，使植株表现了系统感1染症状。这个报道有力地证明了农bacillus能够侵染玉米这种单子叶植物。随着载体系统和转化方法的改进，农bacillus介导的遗传转化不再局限于双子叶植物，在一些单子叶植物如水稻、玉米和小麦等重要的农作物上也相继获得成功。
进入20世纪90年代后，农杆1菌转化法在水稻、玉米等重要的农作物上取得突破性进展。首先是1991年Gould和Shen等利用农bacillus转化玉米茎尖分生组织获得转0基因植株。1998年Lupotto也实现了农bacillus转化玉米的成功，Southern杂交结果显示外源基因能够稳定遗传到下一代。
基因枪转化法
气动式基因枪中具有代表性的是PDS-1000/He，利用由不同厚度的聚苯四甲酰亚1胺膜制成的可裂圆片来调控氦气压力。当氦气压力达到可裂圆片的临界承受压力时，可裂圆片破1裂并产生强烈的气流，使微弹载体携带微弹高速运动，遇到刚性的阻挡网，微弹载体被阻遏，而微弹利用惯性继续向前高速运动，轰击靶1细胞或组织，从而携带外源基因进入细胞内。基因枪法不再受到受体基因型的限制，又能避开原生质体再生的障碍，从而使植物的遗传转化翻开了新的一页。
基因枪转化法在植物遗传转化中的应用：应用基因枪法转化zui早的是Klein等人在1987年将携带有细菌氯霉1素乙酰转移酶（cat）基因的烟1草花叶病毒的RNA导入洋葱的表皮细胞，使此基因得到表达。后来，随着对物理参数（如金属粒子的理化特性、DNA与金属粒子的结合和靶组织特性等）、环境条件（如受体植株、外植体和靶组织所适宜的温度、湿度和光照等）和生物因子（如外植体及其轰击前后的培养条件等）等的技术优化，不断完善的基因枪转化技术能实现对许多受体材料的转化，包括原生质体、悬浮细胞系、愈伤组织、外植体（幼穗、幼胚或成熟胚），甚至可以直接轰击转化花粉。
真核细胞同源重组法
1994 年，Graham F建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒：骨架质粒含有腺病毒绝大部分基因组序列，但不含有包装信号；穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的基因克1隆位点，以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的基因克1隆到穿梭质粒，与骨架质粒共转染293细胞，由于这两个质粒的部分序列有重叠，能够在细胞内发生同源重组，zui终产生完整的载体基因组，并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用，推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低，某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV)，必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒，费时费力，正逐渐被其他方法替代。
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