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电泳原理:
本发明主要由电源和电泳槽两部分组成。电力供应直流,并在电泳槽中产生电场,推动带电分子的迁移。电泳槽可分为水平式和竖直式。立板式电泳是一种比较常用的电泳法,常用于聚丙i烯酰胺凝胶电泳。电泳槽中间有两片夹在一起的玻璃板,玻璃板两边用塑料条隔开,然后将电
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电泳原理:
本发明主要由电源和电泳槽两部分组成。电力供应直流,并在电泳槽中产生电场,推动带电分子的迁移。电泳槽可分为水平式和竖直式。立板式电泳是一种比较常用的电泳法,常用于聚丙i烯酰胺凝胶电泳。电泳槽中间有两片夹在一起的玻璃板,玻璃板两边用塑料条隔开,然后将电泳凝胶放在玻璃板中间,凝胶一般大小12 cm,14 cm厚1~2 mm厚,近几年新开发的电泳槽,胶面更小、更薄,从而节省试剂和缩短电泳时间。在制胶时,将一根塑料梳子放入胶体溶液中,将胶聚物移去,形成上样凹槽。横向电泳,在水平玻璃或塑料薄板上贴一层薄薄的湿滤纸,将凝胶和电泳缓冲液连接起来,或直接将凝胶浸入缓冲液中。当 pH值发生变化时,会使带电分子电荷发生变化,从而影响电泳迁移的速度,因此,应该在合适的缓冲液中进行电泳,使所述缓冲液能保持被分离物带电性能的稳定。
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毛细管电泳中,样品分子的迁移是有效电泳浊度和电渗流清洁度的综合表现,而此时的清净度被称为表观清净。由于石英(或玻璃)毛细管表面的硅羟基解离,在大多数水溶液中都会产生一种负的定域电荷,并指向负极。毛细管中的电渗率比电泳速度大一个数量级,因此样品组分可以实现同向泳动。在电渗和电泳中,正离子的运动方向是一致的,所以它首先流出。中立分子与电渗流同速,随电渗入。负离子在中性颗粒后面流出,其运动方向与电渗方向相反。pH值与电渗流有密切关系。电渗透受 Zeta电位的影响, Zeta电位由毛细管壁表面的电荷决定,而电荷又受缓冲溶液的 pH值影响,因此电渗流的值是缓冲溶液 pH值的函数,一般随 pH值的增加而增大,到中性或碱性时值会变得很大。另外,毛细管洗涤过程、电泳缓冲液组成、粘度、温度等对管壁上解离的影响也会发生变化。电磁以及许多能与毛细管表面作用的物质,如表面活性剂、蛋白质等,对电渗流有很大影响。
电泳法作为一种伴随电泳产生的电动现象,在电泳法中起重要作用。大多数情况下,电渗流速度是电泳速度的5-7倍。毛细管电泳(CE)利用电渗流,使中性分子、正负离子向一个方向发生差速迁移,在一次 CE过程中同时完成正负离子的分离测定。电渗流的大小和方向影响着 CE分离的效率、选择性和分离程度,因而成为分离条件优化的重要参数。CE分离的重复性(迁移时间和峰面积)受电渗流的微小变化严重影响。因此,电渗流的控制是 CE的一项重要工作。控制电渗流的方法主要是改变缓冲液的组成和浓度、改变缓冲液的 pH值、添加添加剂、对毛细管内壁进行改性-物理或化学方法上涂覆及动态去活;外加径向电场;改变温度等。
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质谱仪简介:
质谱也叫质谱仪。隔离和检测同位素的仪器。它是以带电粒子在电磁场中能够偏转的原理为基础的一类仪器,按照物质原子、分子或碎片的质量差异进行分离和检测。根据应用范围,质谱仪分为同位素质谱仪、无机质谱仪和有机质谱仪。根据分辨能力分为高分辨率、中分辨率和低分辨率质谱仪,根据工作原理分为静态仪器和动态仪器。质谱分析仪可以对样品分子进行轰击,比如高能电子流,使分子失去电子变成带正电的分子离子和碎片离子。这两种离子具有不同的质量,不同质量的离子在磁场作用下到达检测器的时间不同,结果为质谱图。
基本公式: q/m= E/B1B2r
MS分析是通过将物质离子化,分离出离子的质荷比,然后测量各种离子谱峰的强度,从而达到分析目的的分析方法。
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2019年9月1日, SCIEX全i球同步发布多通道毛细管电泳 BioPhase8800系统,该系统能同时分析8个样品,容量达96个样品,高i效的连接上下游工艺,加快了产品上市速度。
目前生物制药分析面临着诸多挑战,如何缩短药i物的研制时间、缩短药i物的开发时间、分析更多样本,特别是分析药i物分子,加快筛选和表征,将高通量检测从早期阶段向常规质量控制过渡,需要更全i面、更深入、更迅速地表征分析。与传统的 HPLC相比较,毛细管电泳技术具有分离效i率高、模式多、分析速度快等优点,已广泛用于药典、美国药典中,用于生物技术药i物的纯度、等电点、电荷异质性、糖基分析。
SCIEX BioPhase8800多通道毛细管电泳系统
具有下列性能特征:
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