在McAb的研制过程中,动物免0疫是McAb制备过程中的关键步骤。但是传统动物免0疫方式通常需要二个月左右,不但耗时长,而且抗原消耗的量大、对抗原纯度要求高。本实验试图通过优化传统免0疫小鼠的方法,大大缩短动物免0疫时间并减少了抗原的消耗量,为进一步组装患者肿0瘤组织及血0清中AFP水平检测的试剂盒打下良好的基础,为临床研究、肿0瘤的诊治提供更为有效的工具。
美国出版协会(AA
弗氏完全佐剂
在McAb的研制过程中,动物免0疫是McAb制备过程中的关键步骤。但是传统动物免0疫方式通常需要二个月左右,不但耗时长,而且抗原消耗的量大、对抗原纯度要求高。本实验试图通过优化传统免0疫小鼠的方法,大大缩短动物免0疫时间并减少了抗原的消耗量,为进一步组装患者肿0瘤组织及血0清中AFP水平检测的试剂盒打下良好的基础,为临床研究、肿0瘤的诊治提供更为有效的工具。

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腹0水的纯化
采集复水后,12 000 r/min 离心 15 min,去掉 沉淀等杂质。往离心后的腹0水中加入等体积的 PBS,并添加硫酸铵固体至 50% 饱和,静置 2 h,12 000 r/min离心15 min,弃 上 清,用 PBS 重 新 溶 解 沉 淀,然 后 再次加入硫酸铵固体至 45% 饱和,静置两个小时左右,12 000 r/min 离心 15 min 弃去上清,用少量 PBS 溶解沉淀,即得到较纯的抗0体,对 PBS 透析除去硫酸铵,透析时间为24 h,透析过程中更换透析液两至三次。
原理
新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂,用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆抗0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础,添加了多种具有强免0疫刺激0活性的TLR配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比,具有以下优点:
(1)新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂;
(2)与弗氏完全佐剂不同,不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分;
(3)安全性好,副反应率低;
(4)免0疫针次少、抗原用量低等多方面优点。

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