在McAb的研制过程中，动物免0疫是McAb制备过程中的关键步骤。但是传统动物免0疫方式通常需要二个月左右，不但耗时长，而且抗原消耗的量大、对抗原纯度要求高。本实验试图通过优化传统免0疫小鼠的方法，大大缩短动物免0疫时间并减少了抗原的消耗量，为进一步组装患者肿0瘤组织及血0清中AFP水平检测的试剂盒打下良好的基础，为临床研究、肿0瘤的诊治提供更为有效的工具。
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弗氏不完全佐剂
在McAb的研制过程中，动物免0疫是McAb制备过程中的关键步骤。但是传统动物免0疫方式通常需要二个月左右，不但耗时长，而且抗原消耗的量大、对抗原纯度要求高。本实验试图通过优化传统免0疫小鼠的方法，大大缩短动物免0疫时间并减少了抗原的消耗量，为进一步组装患者肿0瘤组织及血0清中AFP水平检测的试剂盒打下良好的基础，为临床研究、肿0瘤的诊治提供更为有效的工具。
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数字对象唯0一标识(digital object identifier，DOI)被形象地称为“英特网上的条形码”，如同贴了标签的商品，数字对象一旦被分配一个DOI号，无论它处于英特网上的任何位置，通过DOI都能够找到它，因此解决了传统网络标识系统的不稳定性，实现了更有效的网络链接。DOI技术即将成为国际上数字出版界构建数字信息交换平台的首要选择。
杂交瘤细胞的筛选与克0隆
细胞融合后，培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中，培养后半定量换液，培养基更换时应注意轻缓，第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆，第 7 天左右，杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测，筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔，有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆，经过 3 次亚克0隆后，获得了能够稳定 分 泌 抗 MRJ 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养，部分细胞用于腹0水制备单抗，部分细胞冻存备用。
使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度（按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl用量配制）。备注：推荐使用的抗原用量为小鼠每针次10-20μg、家兔每针次20-50μg。
2. 用振荡器充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl）与抗原按体积比1:1混合，并用振荡器剧烈振荡5-10min，直至静止放置10min水油相不分层。备注：与抗原混合前佐剂分层属正常现象，但必须充分混匀后才能取用。
3. 通过皮下或肌肉单点注射免0疫动物，小鼠每针次100μl，家兔每针次200μl。
（1）佐剂与抗原混合后应尽快注射，若放置时间较长出现水油相分层，则必须按上述步骤2重新振荡混匀；
（2）抽入针管前应摇匀，抽入针管后应尽快注射；
（3）尽量选择引流淋巴0结附近（如腋窝和腹0股0沟附近）的皮下或肌肉进行免0疫。
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