杂交瘤筛选杂交瘤细胞的获得是单克0隆抗0体制备的基础，但是如何从复杂的细胞群体中获得高质量抗0体还需要通过高通量的筛选技术。
常规筛选平台中，我们采用的是手工排qiang和96孔板进行筛选。依赖实验人员的手工操作、筛选通量低，并且数据不可追0踪。同时也需要实验人员非常合理有效的安排实验、避免人为失误，尤其是在阳性样品Hit Picking时，从成千上万个样品中挑选阳性样品
HRP标记抗小鼠
杂交瘤筛选杂交瘤细胞的获得是单克0隆抗0体制备的基础，但是如何从复杂的细胞群体中获得高质量抗0体还需要通过高通量的筛选技术。
常规筛选平台中，我们采用的是手工排qiang和96孔板进行筛选。依赖实验人员的手工操作、筛选通量低，并且数据不可追0踪。同时也需要实验人员非常合理有效的安排实验、避免人为失误，尤其是在阳性样品Hit Picking时，从成千上万个样品中挑选阳性样品，且不能出错，这对实验人员是个非常大的挑战。
关于不同细胞的融合问题在学习单克0隆抗0体的制备过程时，学生会有这样的疑惑：与骨0髓瘤细胞融合的是B细胞还是浆细胞，以及融合前是否要...生物_医0药_科研关注 对话TA的zui新馆藏 (共25684篇)2021 SGO || 子0宫内膜癌：基于证据回顾的建议【指南】佳文分享 | 子0宫内膜癌分子分型将如何指导未来临床实践？ESMO摘要速递 | 子0宫内膜癌临床预测模型之列线图，不许你还不会！Nature突破！科学家发明靶向 TGF-β 的“癌0症环境免0疫疗法”，癌0症治0疗或迎新曙光3 TMB分组预后升级版来啦！！
4.确定反应条件
4.1 杂交瘤筛选
用间接 ELISA 方法筛选抗0体
4.2 检测抗原或抗0体
按照推荐的方法和步骤可以满足大多数实验的要求，反应时间、温度和试剂浓度等可以根据实验需要进行调整 每一步都应该进行系统性评价以便获得zui佳的实验条件。试剂通过倍比稀释以确定zui佳 浓度。选择合适的对照，以确定实验中存在的问题，发现引起错误结果和高本底的原因。 确定实验方案和样品数量后，可以准备所需要的各种材料和试剂。实验前，建议所有的试剂 恢复到室温并混匀。
5.2 1X BSA 封闭液:
杂交瘤筛选：稀释浓缩 BSA 稀释/封闭液（1ml 浓缩 BSA 稀释/封闭液+9ml 蒸馏水）
其它检测：稀释浓缩 BSA 稀释/封闭液（1ml 浓缩 BSA 稀释/封闭液+9ml 蒸馏水）
注意：如果在 10X 中出现结晶，加热到室温或 37℃混匀并再溶解。
5.3 1X 洗涤液：
浓缩洗涤液 20 倍稀释（1ml 浓缩洗涤液+19ml 蒸馏水）。稀释的洗涤液室温稳定至少
6 个月。
5.4 二抗工作液：
二抗浓缩液浓度为 0.1mg/ml，2～8℃稳定至少 1 年，使用前用 1X BSA 稀释/封闭液稀释，对大多数实验而言，0.1～2.0μg/ml 工作浓度。
5.5 可溶性 TMB 单组分：直接使用。
5.6 终止液：直接使用。
5.7 标本
5.8 对照
6.实验优化
通过 3 个变量来优化 ELISA 条件: 试剂浓度、温度、孵育时间。一般情况下，室温反应对大多数实验能够得到很好的结果。 优化不同试剂浓度和不同孵育时间，选择zui佳的实验条件。在优化zui佳浓度时，第yi一个 试剂倍比稀释，然后第二个试剂倍比稀释，每一孔都对应于第yi个试剂和第二个试剂的某一个稀释度的组合。
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