高压制备色谱系统价格在线咨询 北京通恒

如何用制备色谱柱制备低含量的杂质？

制备色谱柱为ZorbaxSB-C18 9.4*250mm及gilson馏分收集器，色谱仪为Agilent1100或LC-6A。想用其制备面积归一化法含量为0.05%左右的杂质，初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件，如，流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩，要求将95%以上的主峰切除。

（主峰后有二个杂质靠得很近。）

答：

1.制备用的流动相尽量等级高一点，否则流动相中的杂质会影响LC-MS分析。

2.使用馏分收集器时，延迟体积一定要计算准确，检测器的响应时间设到很小，否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比，如果4.6mm分析柱流速为1mL/min，9.4mm制备柱用1*（9.4/4.6）2,大约为4mL/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg，理论计算0.05%的杂质大约只有5μg，显然浓度太低，尽量是多做几次，合并馏分然后浓缩后做LC-MS分析。

制备柱跑干了影响柱效吗

如果时间不长的话，可以用流动相多冲几个小时，柱效不一定变化很大。如果时间太久，柱效一定变低，具体造成影响有多大，要靠柱效测定来确定，而不是干柱时间的长短。如果跑干了，对于PUMP的影响可能还大些，所以尽量先把管路中的空气抽走再说。

一般说来，制备柱子跑干，属于操作失当。柱子闲置不用时，尽量冲入甲醇或其他有机的溶剂，一定要把两头堵住密封，这样保留的时间会较长。

工业制备色谱

针对分离纯化需求，开发了硅胶微球的制备方法，对硅胶微球的颗粒度、孔径、孔体积、机械强度、化学稳定性等进行了调控和优化，并且实现了硅胶微球的规模化生产。针对各类样品的特征和分离需求设计并合成了系列新型硅胶键合色谱固定相，并且实现了针对不同样品分离需求的个性化分离材料设计与制备在分离材料的基础上，进行了制备色谱方法开发研究，建立了从分析柱规模的色谱条件优化以及模拟制备方法开发，到中试规模制备柱方法验证，等高放大到工业规模制备柱的制备色谱工艺开发。将发展的新型色谱分离材料和分离方法应用于中药、生物发酵和化学合成的分离纯化制备3，实现了很好的工业化应用。

制备纯化效率：对整个色谱制备纯化工艺的评价，尤其是成本方面的考量。

纯度、收率都是有定量的数值决定，而制备纯化效率则是个复杂的评价过程，这个过程主要是对成本（物料成本、时间成本、人力成本）、安全性、一致性等多个方面考量。分离纯化工艺中的进样量、纯化时间、纯化重现性（一致性）、安全性等等都是实际生产过程中各企业需要考虑到的方面，尤其是成规模的企业对制备效率（成本、一致性、安全性）的控制极为看重。