突变的流程
1. 在dam+ 阳性的宿主菌E. coli.增殖获得化的模板DNA
2. 设计2条互补匹配的、突变位点居的突变引物
3. 加入反应组分如buffer、 template、dNTP、complementary mutagenic primers、QuikSolution&QuikChange Lightning Enzyme
4.
EGFR(L858Q)
突变的流程
1. 在dam+ 阳性的宿主菌E. coli.增殖获得化的模板DNA
2. 设计2条互补匹配的、突变位点居的突变引物
3. 加入反应组分如buffer、 template、dNTP、complementary mutagenic primers、QuikSolution&QuikChange Lightning Enzyme
4. 运行反应
5. Dpn I 消化化的模板
6. 转化感受态细胞、铺板筛选
7. 提取 DNA、测序鉴定
点突变（point mutation）是基因突变的一种类型，表示储存遗传信息的DNA序列或RNA序列中有一个碱基或是一个核苷酸发生变化，通常有两种情况：一种碱基或核苷酸被另一种碱基或核苷酸所替换；一个碱基的插入或缺失。
按照突变之后的功能，可以将点突变分成三个类型：
无义突变（nense mutation）：使原本翻译为氨基酸的密码变成停止密码，例如TTC变成ATC。
错义突变（missense mutation）：使密码所对应的氨基酸改变，例如TTC变成TCC。
沉默突变（silent mutation）：密码改变但对应的氨基酸不变，例如TTC变成TTT。
抗原进入机体后，首先一部分被抗原提呈细胞捕获，加工处理后呈递给Th（T细胞辅助细胞，使Th细胞活化，另一部分直接跟B细胞表面的抗原受体（BCR）结合，产生刺激B细胞活化的信号，然后活化的Th细胞给B细胞第二个刺激信号，这时B细胞就被活化产生抗体，和抗原特异性的结合。然后抗体通过自身的巨噬细胞，中性粒细胞等吞噬细胞的受体与这些细胞结合，介导抗原抗体复合物被吞噬，进而被降解。
从基因突变的性质来看，检测方法分为显性突变法、隐性突变法和回复突变法三类。①显性致死突变法，用待测物质处理雄性小鼠，使处理的雄鼠和未处理的雌鼠交配，观察母鼠中的死胎数，死胎数愈多则说明诱发的显性致死突变愈多。这一方法适用于慢性处理，其优点是可靠性较大，而且测试对象是哺乳动物。
除了用来检测基因突变的许多方法以外，还有许多用来检测染色体畸变和姐妹染色单体互换的测试系统。当然对于的致癌活性的的测定是哺乳动物体内致癌情况的检测。但是利用微生物中诱发回复突变这一指标作为致癌物质的初步筛选，仍具有重要的实际意义。
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