冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之。
DMSO应为试剂级等级,无菌且无色是直接购
200-074-401冻存袋代理
冻存袋注意事项
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。
冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存至二日测试是否有antibody之产生。
2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之。
DMSO应为试剂级等级,无菌且无色是直接购买无菌产品,以5~10m1小体积分装,4℃避光保存,勿作多次解冻。
3.冻存细胞数量要足够。无论再怎么小心,细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以,一开始冻存细胞的数量要足够。一般要达到5× 10^6 /毫升,一瓶不够两瓶凑。但是,这个不能一概而论。有些细胞,比如杂交瘤细胞,只需要1-3x 10^6 /毫升
冻存袋介绍
细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。连续培养的细胞系容易发生遗传漂变,有限细胞系终会发生衰老,所有培养的细胞都易受到微生物污染。已建立的细胞系是一种宝贵资源,更换细胞系成本高昂,而且耗费时间。可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。
冻存细胞的装置及方法
本发明的装置由细胞冻存袋;细胞冻存盒,细胞架组成,细胞冻存袋置于细胞架上,细胞架置于细胞冻存盒内.批量冻存细胞的方法:将细胞悬液装入细胞冻存袋中置于细胞架上,再将细胞架放入细胞冻存盒内;将细胞冻存盒投入液氮罐或-7O°C以下冷冻设备冷冻24小时,将细胞冻存袋取出投入液氮中或-70CI以下冷冻设备长期冻存,当需解冻细胞时,拉出细胞冻存袋放入38C-39C℃ 的温水中解冻当凝固物都融化为液体后移入无菌操作台,按无菌操作程序操作将细胞冻存袋中的细胞悬液分装入离心管中离心,弃上清液,按常规解冻细胞来操作.本发明的细胞冻存袋冻存细胞体积达50-200ml,整套装置直接投入液氮中或放入-70°C以下冷冻设备.
细胞冻存步骤
(1)将标本编号,并用Marker笔仔细标注于冻存管管盖及管壁上,同时将每管编号、内容物、取材日期记录于登记本上。
(2)将冻存管装入冻存袋,戴上棉线手套和防护面罩,迅速放入液氮罐中30~60秒速冻,至冻存组织完全冻住,取出待液氮完全挥发(注意动作轻柔,避免液氮溅洒)。
(3)将经液氮速冻后的组织放入-80℃冰箱相应编号盒中,长期保存。
(4)取材完毕后,将剩余新鲜标本浸泡于10%中尔马林液中固定(切记不要拿错病理号),做好和当日冰冻值班医生的交接,避免遗漏。
(5)清洗取材台及取材器具,器具需用消毒液完全浸泡10~15min,清水冲洗后擦干置于干燥处保存备用,取材器具应定期高温消毒。
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