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小鼠抗大鼠IgM诚信企业推荐 博特龙

了解产品参数及价格,请搜索“博奥龙”,进入博奥龙官0网,搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~ 1、水佐剂不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克0隆抗0体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。 2、水佐剂是一种水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可用于免0疫动物。 3、水佐剂
小鼠抗大鼠IgM







了解产品参数及价格,请搜索“博奥龙”,进入博奥龙官0网,搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~





1、水佐剂不破坏抗原天然构象,从而易于筛选获得针对构象型抗原表位的单克0隆抗0体,这是弗氏佐剂所不具备的一个重要特点。

2、水佐剂是一种水溶性佐剂,使用时不需要弗氏佐剂的复杂乳化过程,抗原和佐剂只需简单混合即可用于免0疫动物。

3、水佐剂使用肌肉免0疫途径,与常规小鼠单克0隆抗0体制备过程中使用足垫免0疫或脾内免0疫相比,极大地方便了使用。

4、水佐剂的zui重要用途是可方便地用于制备小鼠多克0隆抗0体。常规多克0隆抗0体制备多使用兔子,不但免0疫针次多、抗原用量大和抗0体产生慢,而且由于技术要求较高而往往需要委托外单位制备。使用水溶免0疫佐剂,任何动物实验人员均可方便地制备小鼠多克0隆抗0体,只需要简单地免0疫5只小鼠,即可在五周后获得1ml高质量的小鼠多克0隆抗0体。

5、水佐剂建议室温运输,2~8oC保存,无菌取用,有效期6个月。



博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。



多抗制备的概念:由多个B淋巴细胞克0隆所产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤:免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。


多抗制备的制备步骤

一、器材

剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼0科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等。

二、试剂

生理盐水

弗氏完全佐剂

弗氏不完全佐剂

二甲0苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3

三、免0疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。

四、兔子的选择

兔子的重量应在四斤以上,两耳光滑,明显可见耳静、动脉,健康。

五、免0疫

用生理盐水稀释免0疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0注射和后大腿进行肌肉注射。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。





取血:

免0疫一周后,可以耳动脉取血检测抗0体效价。因为起初几次免0疫产生的抗0体的效价比较低,头两次取血,够检测用即可。在三次免0疫后,可以获得较高0效价的抗0体,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否则会造成兔子贫0血。

前几次取血用19号针头对兔子进行耳动脉取血,室温过夜析出血0清。

zui后一次取血可以采用颈动脉放血,具体操作如下:

1、家兔仰卧于兔架上固定头部,用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤。

2、沿颈部中线用手术刀切开皮肤约10cm,分离皮下结缔组织,直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血钳止血)。

3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松组织,暴露出颈总动脉后用弯头眼0科镊使之游离,剥离神经和结缔组织。

4、于动脉下套入两根黑丝线,分别置于远心及近心端。结扎远心端的丝线。近心端的动脉用血管夹夹住。

5、用小拇指垫在血管下,用尖头眼0科手术剪在两根丝线间的动脉璧上剪一小口(勿剪断),插入塑料放血管。再将近心端的丝线结扎固定于放血管上,以防放血管滑脱。

6、松开止血钳,使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。





血0清的分离

如果用三角瓶或平皿盛血,将器皿倾斜放置于37oC烘箱2hr,转移到4oC沉淀过夜,第二天早上用吸管吸取血0清。如果用离心管收集,37oC烘箱放置2hr,转移到4oC沉淀过夜,第二天早上离心,10000RCF,10分钟。在血0清中加入NaN3 至终浓度0.02%,分装后-20oC保存。

小结:抗血0清获得之前要件的抗0体的效价、抗0体的特异性以及抗0体的亲和力;获得抗血0清之后,要分装保存抗血0清,一般情况下,-20度可保存数月至数年抗0体的效价都不会发生变化。抗0体的效价可以通过琼脂扩散试验和酶联免0疫吸附试验进行鉴定。




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