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大鼠抗小鼠IgG2b
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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic streaming和cytokinesis等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血0清。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin; 其余两种广泛分布于各种组织中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之间同源性大于90%,但在N-terminal同源性仅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。
注意事项:
1、Actin抗0体在Western实验后,注意回收稀释的抗0体。回收的抗0体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗0体,包括已经使用过的稀释抗0体,4℃保存。
2、 回收后重复使用的抗0体,使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗0体。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验步骤:
1 、首先将ELISA试剂盒恢复室温(大约30分),然后用纯水把清洗液配成工作浓度(1份浓缩清洗液加19份纯水)。
2 、取出酶标板。每个标本需要6孔,阳性对照6孔,阴性对照6孔。多余的用自封袋保存,记得放入干燥剂。
3 、将标本检测孔每孔先加入标本稀释液各50μl。然后将50μl 细胞培养上清(或特异亲和纯化的抗0体)再加入酶标微孔板,每个标本加6孔;阳性对照和阴性对照孔不加标本稀释液也是各加6孔每孔100μl。贴上封板膜37℃温育30分钟。
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
单克0隆抗0体(单抗制备)制备过程有以下几个步骤:
步骤一:细胞免0疫
免0疫动物免0疫动物是用目的抗原免0疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠,按照预先制定的免0疫方案进行免0疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免0疫器0官,刺激相应B淋巴细胞克0隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。
步骤二:细胞融合
采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾0脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨0髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙 二醇。在聚乙 二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨0髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。
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