细胞冻存袋方法
1、消化细胞(同实验二),将细胞悬液收集至离心管中。
2、1000rpm离心10分钟,弃上清液。
3、沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106/ml左右。
4、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。
5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。
6、贴上标签,写明细胞种类,冻存日期。冻存管外
CS50冻存袋供应商
细胞冻存袋方法
1、消化细胞(同实验二),将细胞悬液收集至离心管中。
2、1000rpm离心10分钟,弃上清液。
3、沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106/ml左右。
4、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。
5、将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。
6、贴上标签,写明细胞种类,冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。
7、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟)→冰箱冷冻室(30分钟)→低温冰箱(-30℃ 1小时)→气态氮(30分钟)→液氮。
注意:操作时应小心,以免液氮。液氮定期检查,随时补充,不能挥发干净,一般30立升的液氮能用1~1.5月。
细胞冻存步骤
(1)将标本编号,并用Marker笔仔细标注于冻存管管盖及管壁上,同时将每管编号、内容物、取材日期记录于登记本上。
(2)将冻存管装入冻存袋,戴上棉线手套和防护面罩,迅速放入液氮罐中30~60秒速冻,至冻存组织完全冻住,取出待液氮完全挥发(注意动作轻柔,避免液氮溅洒)。
(3)将经液氮速冻后的组织放入-80℃冰箱相应编号盒中,长期保存。
(4)取材完毕后,将剩余新鲜标本浸泡于10%中尔马林液中固定(切记不要拿错病理号),做好和当日冰冻值班医生的交接,避免遗漏。
(5)清洗取材台及取材器具,器具需用消毒液完全浸泡10~15min,清水冲洗后擦干置于干燥处保存备用,取材器具应定期高温消毒。
动物细胞冻存组织
1. 首先准备好用于包装样本的铝箔或冷冻保存管,并且用油性记号笔在铝箔或冻存管外表多处写明样本编号。
2. 准确切除所需组织后,立即剔除结缔组织和脂肪组织等非研究所需的组织类型。
3. 在RNase-free 的生理盐水中迅速漂洗样本,以去除血渍和污物。
4. 用准备好的铝箔或冷冻保存管装载包裹组织,迅速投入液氮冷却。
5. 填写样本登记单,写明样本名称、组织类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。
冻存袋的使用注意事项
1. 如用液氮罐存放样品,包裹组织的铝箔或冷冻保存管转入样本袋时,请按以下步骤进行:把样本袋(纱布袋等)放入液氮中冷冻一下,而后将液氮冷却的组织放入样本袋
2. 如用广口容器液氮暂存,建议用进口高质量冻存管,油性笔标记后,样品迅速放入管中,拧紧后迅速放入液氮中。然后再转移到超低温冰箱中保存。
3.直接干冰中保存并邮寄的,建议全部用进口冻存管,油性笔标记后,样品迅速放入经干冰预冷的冻存管中,放入样品袋,埋入干冰中,密封包装后,运输。
(作者: 来源:)