yao物对细胞的IC50检测
IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。25%胰酶消化，1:2传代，其后一般3-5d传代1次,选取生长良好的第三代细胞进行后续实验。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质，比如酶，细胞受体或是微生物
原代细胞
yao物对细胞的IC50检测
IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。25%胰酶消化，1:2传代，其后一般3-5d传代1次,选取生长良好的第三代细胞进行后续实验。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质，比如酶，细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面，可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%，该浓度称为50%抑制浓度，即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度，IC50值可以用来衡量yao物诱导凋亡的能力，即诱导能力越强，该数值越低，当然也可以反向说明某种细胞对yao物的耐受程度。
BrdU染色原理
BrdU (5-脱氧尿核苷)是胸腺的衍生物，常用于标记中新合成的DNA,可代替胸腺选择性整合到细胞中新合成的DNA中(细胞周期S期)。细胞沉淀用15mlMEF生长培养基重悬后进行细胞计数(--般8只14天的胎鼠可获得2-3x107细胞)。这种掺入可以稳定存在，随着DNA进入子细胞中BrdU特异性可以用于检测BrdU的掺入，从而判断细胞的增殖能力。BrdU特异性可以用于检测BrdU的掺入，从而判断细胞的增殖能力。
注射或细胞培养后利用抗Brdu单，ICC染色，显示增殖细胞。细胞接种：收到客户细胞后，我们会用细胞计数板计数细胞，得出细胞悬液浓度。同时结合其它细胞标记物，双重染色，可判断增殖细胞的种类，增殖速度，对研究细胞动力学有重要意义。因组织细胞内无内源性Brdu存在，所以Brdu应用较广掺入双链DNA内的Brdu,以氢链与腺呤结合，不能直接与抗Brdu反应，需经解链使Brdu暴露方能被染色。常用的解链方法为盐酸加热、蛋白酶处理等，使DNA双链部分单链化，抗Brdu小鼠单与增殖细胞核内的Brdu结合，再经酶标抗小鼠IgG孵育、
呈色，显示进入S期细胞的情况。
关于细胞冻存的注意事项：
1. 为保持细胞大存活率，一般都采用慢冻存融的方法。
2. 冻存物距液氮面越近温度越低。2作为标志分子,percoll离心后细胞悬液经FACS分选后获得细胞纯度。标准的低冻速度为－1℃~12℃/ 分钟，当温度下降达－25℃时，下降速度可增至－5~－10℃/ 分钟，到－100℃时则可迅速冻入液氮中。因此要适当掌握冻存物下降入液氮中的速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促冰晶形成。
3. 初次冻存者在下降冻存时，宜先用细木棒伸入罐中探测液面位置，然后需用温度计与冻存物并行的办法，以观测下降冻存物的速度、冻存物与液氮液面距离和温度三者关系，当已掌握以上各参数和冻存技术熟练后，仅按下降时间和下降距离便可获理想冻存效果。
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