ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
特点编辑一、、灵敏、特异的;二、稳定的重复性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;四、适用、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;五、节省实验经费。
间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg
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ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
特点编辑一、、灵敏、特异的;二、稳定的重复性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;四、适用、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;五、节省实验经费。
间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;2.次日洗涤3次;3.加一定稀释的待检样品(未知)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二(抗)0.1ml;5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
终止液(3M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸馏水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物缓冲液(PH5.5) 1ml3%H2O2 2μl(8) 抗原、和酶标记。(9) 正常人和阳性对照。

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