QuickShuttle 系列转染试剂是一类具有自主知识产权、独0特配方的阳离子型转染试剂,具有高0效、低毒和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。QuickShuttle 区别于常规转染试剂的两个zui主要特点是:
(1)可在贴壁细胞传代尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);
(2)转染操作可在一分钟内完成。因此,QuickShuttle 特别适
QuickShuttle-BHK-21
QuickShuttle 系列转染试剂是一类具有自主知识产权、独0特配方的阳离子型转染试剂,具有高0效、低毒和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。QuickShuttle 区别于常规转染试剂的两个zui主要特点是:
(1)可在贴壁细胞传代尚未贴壁时立即进行转染(立传立转);
(2)转染操作可在一分钟内完成。因此,QuickShuttle 特别适合用于大量瞬时转染表达目的蛋白,或大量制备各种病毒载体和假病毒。
以高分子聚合物为载体的基因传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染试剂,仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。zui新的高分子聚合物转染试剂是纳米聚合物转染试剂,由于采用新技术和新材料,具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是:分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷,使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞,形成内含体(endosome),DNA从内含体释放,进入细胞质中,再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染试剂在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0
特性能。
注意事项:
1. 质粒 DNA:请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。
2. 稀释液:0.85%(W/V)生理盐水,用低内毒0素纯水配制,高压消毒或除0菌过滤。
3. 培养基:经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试,推荐使用含 5~10%牛血0清的
DMEM,若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 以 24 孔细胞板转染实验为例,推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染试剂用量为 3~5μl,请
在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化。
5. 如果实验目的在于筛选抗药性稳定细胞系,可在细胞传代后尚未贴壁时直接进行转染,从而可节省
18~24 小时的转染前细胞培养时间。

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