实验动物的标记
1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%(咖啡色)。
标记的原则是:先左后右,从上到下。如果动物编号是二位数或三位数,那相应的用二种或三种不同的颜色,不同颜色代表不同位数(个位、十位、百位),标记的原则同上。
模型动物
实验动物的标记
1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%(咖啡色)。
标记的原则是:先左后右,从上到下。如果动物编号是二位数或三位数,那相应的用二种或三种不同的颜色,不同颜色代表不同位数(个位、十位、百位),标记的原则同上。
2. 挂牌法 常用于大动物。写有编号的金属牌挂在动物的颈上来区分动物。对于猴、狗、猫等动物有时可不做标记,只记录它们的外表特征和毛色即可。
3. 笼子编号 标记在笼子上。
以上只介绍了几种的方法,在使用中可灵活掌握。
多样硬化模型(EAE)
EAE模型可由来自髓鞘的蛋白如髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐剂(CFA)免yi诱导,mian疫当天及两天后腹腔注射百ri咳毒su(PTX)而构建。髓磷脂特异性T细胞在外周被ji活,穿过血脑屏障进入zhong枢神经系统并被重新ji活,引发一系列yan症反应,导致脱髓鞘和轴突细胞凋亡,zui终导致神经损伤和失去功能。使用标准化评分系统评估临床症状,衡量疾病的诱导发生程度。病理组织染色切片 可见局部脱髓鞘和炎性白细胞浸润。百奥赛图利用自主开发制备的B-h17A人源化小鼠(敲除小鼠IL-17A基因,同时敲进人IL-17A基因)为针对人IL-17A靶点的MSzhi疗yao效研究提供了一个可靠的MOG诱导的EAE模型。而4周组大鼠未出现典型肺qi肿及气道狭窄结论:COPD的形成与吸烟时间有关,在吸烟量相同条件下,吸烟时间越长,气道和肺组织病变越重,气流受限的发生率越高。
HBV模型的建立方法
(1)方法:主要使用各种技术来创建HBV病毒小鼠模型。小鼠模型可分为HBV部分片段和HBV全长或超长序列模型。
(2)模型特征HBV小鼠不受HBV的影响,不会引起免yi清除。该模型可用于观察HBV对肝细胞的直接破坏作用。含有外源启动子的HBsAg小鼠(50-4)产生大量HBsAg大包膜蛋白。这会导致很长的,有时是分支的杆状HBsAg积聚在肝细胞的内质网中,并且无法有效分泌。肝细胞显示出毛玻璃变色并损害肝细胞。小鼠中的HBV标记主要在gan脏中表达,也可以在shen脏,yi腺和外周血等qi官中表达,尤其是在1,096 bp 1.3拷贝的HBV小鼠中。xue清HBV DNA的水平相当于3x10000000至9x10000000基因组当量/毫升,相当于慢性HBVgan染者的水平。它可以检测血液中的HBsAg,S1前和HBeAg,是用于yao物筛选的you秀模型。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。
(3)建立比较yao物HBV小鼠模型在HBV分子生物学和免yi学研究中,特别是在加强肝细胞HBV感ran的分子机制方面,具有重要意义。
大动脉转位致紫绀型心脏病动物模型
【造模方法】 体重为1.5~2.0kg雄性新西兰兔,按30mg/kg体重的剂量经耳缘静脉注射硫喷妥钠麻l醉,然后每隔30min静脉注射3~5mg/kg体重的剂量维持麻l醉。动物行仰卧位固定,前胸部皮肤常规去毛后消毒,作前正中无菌手术切口,切开皮肤、皮下组织及肌层,于第6、第7肋间水平横断胸骨,延正中线向上剪开胸骨,撑开器撑开,剪开心包,暴露心脏,注意保持纵隔胸膜的完整。游离肺动脉后,用4号丝线双活结结扎左心耳根部以阻断血流,于左心耳内注入1%肝素,用侧壁钳钳夹肺动脉左侧壁,在与左心耳对应部位剪开4~5mm的切口,用8/0的无损伤尼龙缝合线将肺动脉与左心耳侧侧吻合,先连续外翻缝合后壁,再间断外翻缝合前壁。缝线打结前排尽空气,先松开左心耳根部的结扎线,再缓慢松开肺动脉上的侧壁钳。生理盐水冲洗胸腔,置入硅胶引流片,关胸。术后每日肌肉注射青l霉l素40万U以预防感l染,共5d,术后3d拔取引流条。手术当中观察左心耳的颜色变化。于术后第4周,麻l醉,经腹l股l沟处切口l,l暴露股动脉,抽血测定pH值、氧分压(PO2)、二氧化碳分压(PCO2)、氧饱和度(SaO2)、血红蛋白含量(Hb)、红细胞比容(Hct)。采血后处死动物,观察心脏及吻合情况。术中吻合完成时可见左心耳颜色明显变暗,术后4周处死动物可见双心室轻度扩大,以右心室明显,吻合口通畅,直径为3~4mm,吻合口处光滑。术后1周动物的PO2、SaO2明显降低。术后第4周,PO2和SaO2的降低程度有所减小,考虑是代偿的原因。注意吻合口的大小要严格控制在4~5mm,太大时,严重的低氧会造成动物早期死l亡;太小时,有不能满足实验的要求,且容易形成血l栓而堵塞吻合口。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。
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