冻存袋简介
属于医院器械领域,涉及一种适合细胞回输用的细胞冻存袋,即生物样品存储袋,包括:一存储袋袋体和与其逐一并排排列的2~6个第二存储袋袋体;一和第二存储袋袋体之间,以及各个第二存储袋袋体之间设置袋体间连接管路;一存储袋袋体上沿设置一输入口并通过该输入口与连接管的一端连接,生物样品经由连接管并通过输入口进入一存储袋袋体;一存储袋袋体上沿设置一取样口,各个第二存储袋袋体
200-074-400冻存袋批发
冻存袋简介
属于医院器械领域,涉及一种适合细胞回输用的细胞冻存袋,即生物样品存储袋,包括:一存储袋袋体和与其逐一并排排列的2~6个第二存储袋袋体;一和第二存储袋袋体之间,以及各个第二存储袋袋体之间设置袋体间连接管路;一存储袋袋体上沿设置一输入口并通过该输入口与连接管的一端连接,生物样品经由连接管并通过输入口进入一存储袋袋体;一存储袋袋体上沿设置一取样口,各个第二存储袋袋体上沿设置第二取样口,一取样口和第二取样口用于将存储在袋体内的生物样品取出.本存储袋能够方便地用于对生物样品例如脐带血造血千细胞,血浆等处置,存储,冷冻,复苏以及直接给患者回输生物样品特别是造血细胞.
冻存袋的背景知识
采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。
细胞冻存复苏方法
1. 细胞实验室进行常规消毒,紫外照射40min以上。
2. 培养液(DMEM)、0.25%胰蛋白酶(Trypsin)恒温水浴箱37°C预热20min,备用。
3. 二亚砜(DMSO)在40°C冰箱中冷藏30min,备用。
4. 从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入400°C水浴中,摇晃,直至冻存液完全融化。
5. 将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心(1000r/min,5min)。
6. 用培养液悬液混悬沉淀细胞,调整细胞浓度,方培养箱中培养。
7. 记录复苏日期。
细胞冻存袋操作需要注意?
1.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
2.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。
3.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响 细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是 10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
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