材料与方法
一、材料
AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。
二、方法
1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良
氢氧化铝佐剂
材料与方法
一、材料
AFP购自上海领潮公司。SP2／0骨0髓瘤细胞(中科院上海细胞库)。8～12周龄Balb／c小鼠(第四军0医大学实验动物中心)。SPF级。
二、方法
1．动物免0疫：将4只8～12周龄Balb／c小鼠随机分为两组，每组2只，分别命名为1号和2号(第yi组)、3号和4号(第二组)。第yi组按常规免0疫方法进行免0疫一…，第二组采用改良的免0疫方法进行免0疫。免0疫前静脉采集少量血液，析出血0清作为后续检测的阴性对照血0清。
第yi组：AFP50ug(50肚1)与等量福氏完全佐剂(Sigma，美国)混合，充分乳化后注入8～12周龄Balb／c小鼠腹腔，2周后用同量抗原加不完全福氏佐剂(Sigma，美国)腹腔注射，4周后用同量抗原加不完全福氏佐剂腹腔注射，融合前3 d作腹腔注射加强免0疫。
饲养层细胞制备
于细胞融合天，准备饲养层细胞，常选用小鼠腹腔渗出细胞，其中主要是巨噬细胞和淋巴细胞。应用腹腔渗出细胞的好处是: 一方面做饲养细胞，另一方面巨噬细胞可以吞噬死0亡的细胞和细胞碎片，为融合细胞的生长造成良好的环境。腹腔细胞的数目应适宜，过少则不能提供杂交瘤细胞所需要的生长因子，过多会阻碍杂交瘤细胞的贴壁，一般以铺满孔底 30% 为好。
腹0水制备产生单克0隆抗0体
0． 5 mL 弗 氏 完 全 佐 剂 腹 腔 注 射 4 只 雌性 BALB / c小鼠，同时培养杂交瘤细胞，弗氏完全 佐剂注射七天后，收集状态较好的杂交瘤细胞，洗涤后稀释注入小鼠腹腔，每只小鼠约 1 × 106 个，杂交瘤细胞注射 7-10 天后观察可见小鼠腹部肿大，则可以进行腹0水采集。
果蝇 mrj 的表达情况的检测
分别提取野0生型果蝇 R6 品系和 mrj 的 p 因子插入突变品系 15059 总蛋白，测定蛋白浓度后，上样量为 50 μg 进行 SDS-PAGE 电泳，使用制备的 MRJ 单克0隆抗0体进行 Western Blot 检测。
单抗腹0水制备用佐剂
货号规格KX0210048-1010mlKX0210048-500500ml 将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔，每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右（一般12-18天），然后注射杂交瘤细胞，建议每只注射80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天，但通常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍，且单抗腹0水效价不变。
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