研究新型无液氮降温仪与传统液氮降温仪在精1子冷冻保存方面的成本分析,结果显示点成的CRF-1免液氮程序降温仪的运行成本仅为传统液氮降温仪的1%。Willem博士等人在英国伦敦医学院采用点成的CRF-1免液氮程序降温仪,冷冻保存肝细胞(HepG2)球体(ELS),冷却速度为1°C / min,冷冻后,用37摄氏度温水复苏,成活率为97.8±0.5。远高于传统的液氮程序降温仪。
自动化程序降温仪
研究新型无液氮降温仪与传统液氮降温仪在精1子冷冻保存方面的成本分析,结果显示点成的CRF-1免液氮程序降温仪的运行成本仅为传统液氮降温仪的1%。Willem博士等人在英国伦敦医学院采用点成的CRF-1免液氮程序降温仪,冷冻保存肝细胞(HepG2)球体(ELS),冷却速度为1°C / min,冷冻后,用37摄氏度温水复苏,成活率为97.8±0.5。远高于传统的液氮程序降温仪。
程序降温仪,也叫程序冷冻仪,胚胎冷冻仪是实现生物样本低温冻存的关键设备。在常温样本需要向液氮低温环境转移时,可以介导生物样本的降温过程。广泛应用在移植、脐血冻存、眼、心脏瓣膜样品冻存过程中,降温速率是影响细胞复苏活性的关键因素:过快/过慢都会对细胞造成损伤以致影响复苏活性。降温速度过快时,细胞内的水迅速结晶,冰晶会对细胞造成内部损伤;如果降温速度过慢,细胞外的水先结冰,会在细胞内外产生渗透压,会造成细胞脱水,降低细胞复苏率。、皮肤等组织的低温保存等领域,并正在向低温材料学科和农牧领域扩展。
慢速降温保存通常采用“两步法”,即步先将生物样品采用某个较慢的降温速率降温到 -80℃并维持一段时间,然后第二步再将己经处于 -80℃状态的生物样品直接投入液氮罐里( -196℃)进行深低温的长期保存。慢速降温法的实质是使用较慢的降温速率,使得降温过程中细胞内的水逐渐脱离细胞,以达到减少细胞内冰晶形成的概率的目的,从而提高细胞的存活率。他的优势是所用的冷冻保护剂浓度较低,只需要3%-20%左右,但容易造成冷损伤和渗透压失衡。
在细胞冻存的过程中,液态水转化为冰,细胞代谢停止。同时,水分也随之散失,导致细胞内盐、代谢物浓度改变,进而造成渗透压失衡,直接影响冻存细胞的复苏。同时,冷冻速率太快或太慢,容易导致细胞内水分丧失或形成大冰晶,都不利于细胞存活。通过使用程控降温仪,选择合适的冻存液,设定合适的升降温速率,可有效地克服上述不利因素。实践证明,(经温度补尝后)每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。
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