T4 RNA连接酶
用途：用RNA 3'末端标记；RNA和RNA分子间连接；寡核苷酸的环化；tRNA修饰；5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链；在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。
来源：由大肠杆1菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：37℃30分钟内，催化1 nmol 5'-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义
DNA片段化
T4 RNA连接酶
用途：用RNA 3'末端标记；RNA和RNA分子间连接；寡核苷酸的环化；tRNA修饰；5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链；在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。
来源：由大肠杆1菌表达，表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义：37℃30分钟内，催化1 nmol 5'-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：50mM Tris-HCl(pH7.5)，10mM MgCl2，10mM DTT，1mM ATP，10μM 5'-[P]-(A)12-18(10μM in 5'-termini)。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷1酸酯酶。
酶储存溶液：10mM Tris-HCl(pH7.5)，1mM DTT，50mM KCl，0.1mM EDTA，50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X)：500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃)，100mM MgCl2，100mM DTT。
低碱性磷酸酶血症的症状存在异质性，其临床症状多样，需要及时进行cure
典型症状
1、单纯牙型乳牙会出现早期脱落的情况，仅仅表现出牙齿受累的症状表现。
2、围生期型患者会出现四肢短小的症状，主要因为严重骨骼矿化不足，然后造成骨骼系统异常的症状表现。
3、良性新生儿型患者会出现骨骼畸形的情况，比如漏斗胸，以及身材矮小的症状，但是这种类型的症状，在出生以后可以达到改善。
4、婴儿型患者会出现牙齿早脱的症状，通过X-ray检查，可以显示未成熟牙齿早失的症状，如果出现佝偻病的情况，患者会出现胸廓畸形、头颅畸形的症状，患者的囟门会变得宽大，但是常常会出现颅缝早闭的情况。
DNA copy的引发
所有DNA的 copy都是从固定起始点开始的，而目前已知的DNA聚合酶都只能延长已存在的DNA链，而不能从头合成DNA链，那么一个新DNA的 copy是怎样开始的呢？研究发现，DNA copy时，往往先由引发酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶从RNA引物 3'端开始合成新的DNA链。对于前导链来说，这一引发过程比较简单，只要有一段RNA引物，DNA聚合酶就能以此为起点一直合成下去。但对于滞后链来说，引发过程就十分复杂，需要多种蛋白质和酶的协同作用，还牵涉冈崎片段的形成和连接。
DNA新链的延伸由DNA聚合酶 III所催化。为了copy的不断进行，解旋酶须沿着模板前进, 边移动边解开双链。由于DNA的解链，在DNA双链区势必产生正超螺旋，在环状DNA中更为明显，当达到一定程度后就可能造成copy叉难以再继续前进，但在细胞内DNA的copy不会因出现拓扑学问题而停止，因为拓扑异构酶会解决这一问题。
随着引发体合成RNA引物，DNA聚合酶 III开始不断地将引物延伸，合成DNA。DNA聚合酶 III是一个多亚基复合二聚体，一个单体用于前导链的合成，另一个单体用于滞后链的合成，因此它可以在同一时间分别copyDNA前导链和滞后链。虽然DNA前导链和滞后链copy的方向不同，但如果滞后链模板环绕DNA聚合酶III,并通过DNA聚合酶 III,然后再折向未解链的双链DNA的方向，则滞后链的合成可以和前导链的合成在同一方向进行。
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