固相萃取柱的选择及常见问题
根据基质性质选择:
吸附剂主要可根据目标化合物性质和基质性质进行选择。
吸附剂的选择则大致可由以上两种方式进行选择,对于具体实例,可依据“区分目标化合物和主要干扰物”的原则进行选择。
选择出适宜的吸附剂后,还需要根据检定所需的样品量选择合适的柱规格。由于萃取柱的吸附剂能吸附的化合物质量是有限的,一旦超过了这个数值,目标物就不能
氨基固相萃取柱厂家
固相萃取柱的选择及常见问题
根据基质性质选择:
吸附剂主要可根据目标化合物性质和基质性质进行选择。
吸附剂的选择则大致可由以上两种方式进行选择,对于具体实例,可依据“区分目标化合物和主要干扰物”的原则进行选择。
选择出适宜的吸附剂后,还需要根据检定所需的样品量选择合适的柱规格。由于萃取柱的吸附剂能吸附的化合物质量是有限的,一旦超过了这个数值,目标物就不能被有效保留,使得洗脱效果大打折扣。因此,根据样品中的组份量选择合适的柱规格,是很有必要的。
固相萃取柱该用什么溶剂进行活化、淋洗和洗脱
对于这个问题,简而言之,就是无法统一标准,必须根据样品的性质、溶剂背景等情况来进行选择。
一般来说,标准回答是:固相萃取柱该用什么溶剂进行活化、淋洗和洗脱,这没有统一的规定,请根据您分析所依据的、药典或者已经验证的方法来。
1、活化:固相萃取柱活化的目的有两个,一个目的是为了浸润填料、以便样品溶液能流过固相萃取柱;另一个目的是为了清洗固相萃取柱上面的干扰杂质以及溶剂残留。
2、上样:让样品溶液流过固相萃取柱,让填料吸附目标物质。一般流速不能太快,否则吸附不完全,会导致回收率低下。
3、淋洗:需要选择合适溶剂,既不会把吸附在固相萃取柱填料上面的目标产物洗掉,又能清洗掉一些干扰杂质,这个的选择也是根据既有方法来的,没有统一标准。
4、洗脱:选择合适的溶剂来把吸附在固相萃取柱填料上的目标物洗脱掉(大多数时候需要用试管来收集),这个溶剂也是根据具体实验方法来定的,无法统一规定。
固相萃取原理介绍
固相萃取(SPE,Solid Phase Extraction)就是利用分析物在不同介质中被吸附的能力差将标的物提纯,有效的将标的物于干扰组分分离,大大增强对分析物特别是痕量分析物的检出能力,提高了被测样品的回收率。SPE技术自上世纪70年代后期问世以来,发展迅速,广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域 。
使用固相萃取柱时应注意的影响因素
溶剂的选择
在固相萃取中,萃取固定相的活化、上样富集、淋洗杂质、分析物洗脱的过程中,都涉及溶剂的选择问题。溶剂选择重要的是溶剂强度,这是保证固相萃取成功的关键表2给出了常见正相型和反相型固相萃取中溶剂的极性和强度大小关系。
对于固定相活化溶剂,一般先使用强的溶剂去除固定相上的杂质,然后选择与上样溶剂强度一致的活化溶剂,以保证样品能够在固定相上充分保留。需注意的是,固定相在活化过程和活化结束后都要保持湿润,否则会使固定相干裂或者进入气泡,导致柱效降低、回收率降低以及重现性变差。
对于上样溶剂的选择,要尽可能选择弱强度的溶剂,保证样品能够充分地保留在固相萃取柱上,还可以采用大量上样方法,提高富集倍数。如果上样溶剂强度过高,样品不能保留或者弱保留,则回收率低。
对于洗脱溶剂,要选择溶剂强度比较大的,保证保留在固定相上的样品洗脱下来,对大多数化合物来说,是一种比甲、乙醇更好的洗脱溶剂。另外,选择的洗脱溶剂要与后续的分析条件相适应。还有就是要选择黏度小、纯度高、毒性小并且不与样品和固定相发生反应以及不会干扰样品后续检测的溶剂。如果单一的洗脱溶剂效果不理想,也可考虑使用混合溶剂进行洗脱。
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