然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与次孵育结合上的HEV IgM相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应
1、 ：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内的试管。收集血液后，
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然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与次孵育结合上的HEV IgM相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEV IgM和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应
1、 ：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
终止液（3M H2SO4）：蒸馏水178.3ml，逐滴加入（98%）21.7ml。（5） 底物缓冲液（PH5.0磷酸枣柠檬酸）:0.2MNa2HPO4（28.4克/L）25.7ml0.1M柠檬酸（19.2克/L） 24.3ml加蒸馏水50ml。（6） TMB（四）使用液:TMB（10mg/5ml无水乙醇）0.5ml底物缓冲液（PH5.5） 10ml0.75%H2O2 32μl（7） ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物缓冲液（PH5.5） 1ml3%H2O2 2μl（8） 抗原、和酶标记。（9） 正常人和阳性对照。
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