ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应,所以任何的诊断剂离不开好的原料,如抗原,酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原,而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的,而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂,
酶联ELISA试剂盒厂家
ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应,所以任何的诊断剂离不开好的原料,如抗原,酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原,而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的,而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
ELISA试剂盒的分类
检测范围和灵敏度不同,用量少时,可使用分装,前期是它的长久性不是很好。
试剂盒的标准曲线高点OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。
试剂盒重复性好,板内、板间变异系数均<9 %。
试剂的组份都多给20%的富余量,确保完成48/96孔的检测,避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。
检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作,保证实验结果的重复性。
Elisa试剂盒的注意事项
Elisa试剂盒是否灭活:加热可灭清中补体系统,在较少数情况下(培养ES细胞,平滑肌细胞时)建议灭活,在培养其余细胞时不建议灭清。灭活非常容易产生沉淀,如必须灭活请按56℃,30 min,轻微摇晃原则操作,灭活温度高、时间长、摇晃不均都容易产生沉淀。
Elisa试剂盒培养基:无培养基在结果重复性、细胞体外分化方面有优势,但是,仍然是培养液中基本的添加物,尤其是在原代培养或细胞生长状态不良时,常常会先使用有的培养液进行培养,待细胞生长旺盛后再换成培养液。
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