细胞培养过程中,常常因为环境带来的污染而影响细胞培养实验的质量,甚至直接导致细胞培养的失败!这些污染可能来自于以下几个方面,例如:
1、空气:空气是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径。空气流动性大,如果培养操作场地于外界隔离不严格或消毒不充分,外界不洁空气很容易进入造成污染。因此,培养设施不能设在通风场所。无菌操作应在净化台内进行,工作时要带口罩,以免因讲话、咳嗽
悬浮细胞培养
细胞培养过程中,常常因为环境带来的污染而影响细胞培养实验的质量,甚至直接导致细胞培养的失败!这些污染可能来自于以下几个方面,例如:
1、空气:空气是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径。空气流动性大,如果培养操作场地于外界隔离不严格或消毒不充分,外界不洁空气很容易进入造成污染。因此,培养设施不能设在通风场所。无菌操作应在净化台内进行,工作时要带口罩,以免因讲话、咳嗽等使外界污染进入操作面,造成污染。
2、器材:各种培养器皿、器械消毒不和洗刷不干净导致污染,另外需要对培养箱进行定期消毒,防止形成污染
3、操作:实验操作无菌观念不强,技术不熟练,使用污染的器皿或封瓶不严等,都可以造成污染。培养两种细胞以上时,操作不规范,交叉使用吸管或培养液、瓶等有可能导致细胞交叉污染。
4、培养液:有些培养液在生产时就已经被支原体或病毒等污染,变成了污染。
5、样本:原代培养的污染多数来源于样本;
细胞培养的目的究竟是什么?
1.1 研究开发,如新药筛选,疫1苗、基因工程、细胞工程研究与开发、单抗1体制备等。
1.2 基础研究,如作用机理、基因功能、疾病发生机理等研究。
2 生物制药,疫1苗生产:如病毒性疫1苗(肝2炎病毒疫1苗、艾1滋病疫1苗等),多肽疫1苗(肿1瘤疫1苗)等。
2.2 基因工程生产:如EPO等。
2.3 抗1体、基因治1疗生产。
2.4 细胞工程生产:生物细胞内的一些生物活性多肽,生物活性物质等。
2.5 利用细胞法体外测定生物活性物质的活性;并预测其在体内的和替代体内法检测其成品的生物活性。
RCCS-3D三维细胞培养中原代细胞的分离方法?
凡是来源于胚胎、组织器1官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或的悬液材料,简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层,这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料,由于细胞间结合紧密,为了使组织中的细胞充分分散,形成细胞悬液,可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
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