小分子类物质包含多肽、天然小分子、化学合成小分子等一系列的物质,被广泛用于medicine等各个领域。以往小分子的定量检测主要通过气相和液相色谱完成,存在周期长,检测仪器价格昂贵等多方面的不足。那么immune检测技术可以用于定量检测小分子吗?
免1疫检测试剂盒的技术基础就是抗原和抗1体的特异性结合,小分子特异性抗1体的制备即是小分子immune检测试剂盒制备的关键之
RNA上样Buffer
小分子类物质包含多肽、天然小分子、化学合成小分子等一系列的物质,被广泛用于medicine等各个领域。以往小分子的定量检测主要通过气相和液相色谱完成,存在周期长,检测仪器价格昂贵等多方面的不足。那么immune检测技术可以用于定量检测小分子吗?
免1疫检测试剂盒的技术基础就是抗原和抗1体的特异性结合,小分子特异性抗1体的制备即是小分子immune检测试剂盒制备的关键之处。小分子由于分子量小,结构简单,在免1疫学上划归为半抗原(Hapten),即只有immune反应性而没有immune原性的一类物质,不能直接刺激机体产生antibody但是却拥有和antibody结合的特性。随着抗1体制备技术的发展,小分子特异性抗1体的制备技术显得更为多元化
如何评价和选择支原体检测试剂盒
1. 灵敏度。
灵敏度常用支原体基因组的拷贝数或支原体菌株的CFU表示。
2. 特异性和广谱性。
质量好的试剂盒应检测的支原体物种越多越多,并且特异性强,即只针对支原体,不针对其他细菌等微生物,没有交叉反应。
3. 稳定性。
冻干粉比液体试剂的稳定性高。
4. 样本类型及样本处理。
一款好的试剂盒,会标出它适合的样本类型,也会说明如何处理样本。要注意有的样本含有抑制PCR反应的物质,因此需要处理。
5. 对照品。
一个好的试剂盒,会带有阳性对照和内控对照。内控对照是用于监测PCR是否正常。如果样本含有抑制PCR的物质,则内控对照的条带会发生缺失。有严重支原体污染的样本由于样本中的支原体对内控对照产生了竞争性抑制,因此支原体条带越强,内控条带越弱
水中微生物DNA提取试剂盒,样本制备步骤。
步骤1. 样本过滤
1.1 从试剂盒中小心取出滤膜。用水样润湿滤膜。
1.2 将滤膜放置在滤器中,并过滤必要体积的水样。
步骤2. 菌体裂解
* 提前准备:预先将恒温仪设置到70℃,将恒温箱设置到37℃。
2.1将样本过滤后的滤膜翻转放置到试剂盒提供的IncubationDish(平皿)中。
2.2 吸取2mllysis buffer(裂解液),并加到滤膜上。
2.3 将滤膜浸泡在裂解液中,小心摇匀平皿并在37°C孵育30分钟。
2.4 用平皿中的裂解液冲洗滤膜,并摇晃平皿10秒钟。
2.5 将平皿中的400μl裂解液转移至IncubationTube(孵育管),70°C孵育10分钟。
2.6 样本短暂离心,并加入400μl Binding Buffer(结合液),立即涡旋充分混匀,以防止DNA沉淀。请勿离心样本,并立即进行下一步。
步骤3. DNA提取
3.1 将步骤2.6中的混合液(~800μl)转移到CollectionTube(收集管)内的SpinColumn(离心柱)中,小心液体不要沾到离心柱的边缘。
3.2 离心柱离心≥10000× g,1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。
3.3 离心柱中加入500μl洗液1。离心≥10000×g,1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。
3.4 离心柱中加入500μl洗液2。离心≥10000×g,1分钟。弃掉收集管中的液体。将离心柱插到一个新的收集管中。
3.5 zui大速度离心3分钟,以去除残留的洗液2。
3.6 弃掉收集管。
3.7 吸取60μl已70℃预热的洗脱液,直接加到离心柱的硅胶膜上。硅胶膜表面应全部覆盖洗脱液。
3.8 室温静置2分钟,然后离心8000×g,2分钟,以洗脱DNA。
3.9 样本保存管中的洗脱液即包含DNA,可直接用于PCR,或储存在2~8℃,可存放1周。长期储存是在≤-18℃。
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