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佛山质谱消耗品供应商咨询客服「广州联方」

SCIEX耗材售后代理——广州联方实验器材有限公司可为您提供实验室和生产所需要的SCIEX耗材 作为一种新型的治i疗手段,基因治i疗已进入到临床阶段,目前已受到世界各i国的高度重视。在此过程中,目的基因需要导入到人体,起到治i疗作用。引进人体至受关注的方法是利用载体进行运输。 由于具有安全性好、寄主细胞宽、外源基因在体内表达时间长等特点,腺相关病毒(AAV)被认为是
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SCIEX耗材售后代理——广州联方实验器材有限公司可为您提供实验室和生产所需要的SCIEX耗材

作为一种新型的治i疗手段,基因治i疗已进入到临床阶段,目前已受到世界各i国的高度重视。在此过程中,目的基因需要导入到人体,起到治i疗作用。引进人体至受关注的方法是利用载体进行运输。

由于具有安全性好、寄主细胞宽、外源基因在体内表达时间长等特点,腺相关病毒(AAV)被认为是至有前景的基因转移载体之一,在基因治i疗和疫i苗研究中得到广泛应用。

为确保 AAV相关产品的安全性和质量,需要对 AAV衣壳蛋白进行纯度分析。但 AAV载体在开发初期,蛋白质含量极i少,甚至更少,这对研究者的分析工作提出了挑战。

采用SDS-PAGE法对银染法或红宝石染色法进行检测,虽然灵敏度较高,但操作复杂、费时。在毛细管电泳的基础上,发展出一种取代 SDS- PAGE的CE-SDS方法,该方法具有分辨率高、定量准确、重复性好、自动化程度高、速度快等优点。

SCIEX公司利用其多年积累的技术优势,研制了一种基于毛细管电泳的腺相关病毒(AAV)衣壳。

本方法的主要优点:

1、简单明了的样品制备程序

2、VP1, VP2, VP3分辨率极

3、病毒蛋白的CPA%(校正峰面积%)的RSD小于0.7%

4、样品浓度与吸光度的线性关系良好,R2 =0.9991

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SCIEX耗材南区总代理——广州联方实验器材有限公司可为您提供实验室和生产所需要的SCIEX耗材

高i效液相色谱的工作原理及常用类型:

高i效液相色谱的工作原理是怎样的?

柱色谱中,在重力作用下,将溶剂滴入一个装有吸附剂的色谱柱中。高i效液相色谱是一种改进的柱色谱法。当高压达到400个大气压时,泵将溶剂输送到色谱柱中。柱状吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如硅石或聚合物)制成的颗粒材料。

和柱状色谱相比,采用泵输送,既能分析,又能用较小的颗粒作柱填料。颗粒越小,表面积越大,通过固定相与流动相以及样品组分之间的相互作用,就能更好地实现混合物中的组分分离。一般情况下,流动相是一种溶剂的混合物(例如水,,)。

由于混合物组分与吸收剂粒间相互作用的程度不同而相互分离,在此过程中,不同组分的洗脱率不一样,造成了组分离分离。高i效液相色谱的自动化程度高,与柱色谱相比,具有较高的灵敏度。







高i效液相色谱高i效液相色谱常见类型有哪些?

其中两种至常见的高i效液相色谱为正相高i效液相色谱和反相高i效液相色谱。

正相高i效液相色谱:

柱子中填充微粒二氧化硅和非极性溶剂,如正己烷。一个典型的柱长在150到250 mm之间,其内径小于4.6毫米。由于极性化合物在极性二氧化硅表面的粘附时间较长,混合物中的非极性化合物通过色谱柱的速度加快。

反相高i效液相色谱:

在柱子中填充二氧化硅粒子,并对其进行改性,使长碳氢链(8~18个 C原子)附着在表面,从而达到非极性。用极性溶剂,如水、醇、甲i醇等。因为在极性溶剂和极性分子之间有很强的吸引作用,混合物中的极性化合物会更快地穿过色谱柱。在通过色谱柱时,非极性分子的速度减慢。他们对烃基的吸引主要是通过范德华分散力和疏水作用产生不同程度的吸引。其在流动相中的溶解度也较低,这有助于它们与烃基的相互作用。

反相高i效液相色谱是目前使用至广泛的高i效液相色谱技术。







色谱柱的使用与维护。

柱子是高i效液相色谱仪器中至主要的组成部分,被测物质是否能很好地分离和测定,色谱柱的性能起着决定作用。为了延长色谱柱的使用寿命,在日常工作中应特别注意色谱柱的正确使用和维护。

1、采用预柱和保护柱。在泵和进样器之间安装预柱(pre-column),它使色谱柱中的流动相达到了的平衡,并防止那些破坏柱填料的成分或污染物进入色谱柱。保护柱(guardcolumn)将那些能够被牢固地吸附在色谱柱上的成分阻挡在色谱柱中,并且保护柱应该与色谱柱中的填料相同。无需频繁更换色谱柱,即可频繁地更换预柱和保护柱,从而延长色谱柱的使用寿命。

2、阻止气体进入色谱柱。一些色谱柱(例如凝胶柱)不允许进入气泡,否则会使柱效降低甚至形成的难驱性气室。所以,为了防止气泡进入色谱柱,请确保使用已脱气的流动相,并严格按照以下步骤安装色谱柱。拆下色谱柱入口处的密封螺钉,观察是否有溶剂渗出; b.如



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