间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
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间接法1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；2.次日洗涤3次；3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；6.’后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
发展前景编辑临床测定技术的发展主要在于方法学的发展，而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用。分子生物学正在并终肯定会让对整个生命科学有一个而的认识，其对测定技术发展的影响也是直接而又有效的，对以些难以检测的生物活性物质的测定，并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。苏州梦犀生物科技有限公司
器材（1） 聚塑料板（简称酶标板）40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。（2） 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。（3） 4℃冰箱，37℃孵育箱。试验原理试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验（ELISA）.已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
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