低温生物菌种——菌种分离方法
组织分离法
先将所需的药用真菌采集回来，选取新鲜、个体大、壮实、中龄及无病虫害的子实体（或菌核、菌索），作为分离用的材料。若为子实体，取其菌盖或菌柄组织；若为菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若为菌索，取其部分根状菌索（如蜜环菌）。再用75 %酒精进行表面消毒2 分钟，用无菌水（或冷开水）冲洗数次，洗净残留的药液后切成小块。，然后，放
微生物菌种去除种类
低温生物菌种——菌种分离方法
组织分离法
先将所需的药用真菌采集回来，选取新鲜、个体大、壮实、中龄及无病虫害的子实体（或菌核、菌索），作为分离用的材料。若为子实体，取其菌盖或菌柄组织；若为菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若为菌索，取其部分根状菌索（如蜜环菌）。再用75 %酒精进行表面消毒2 分钟，用无菌水（或冷开水）冲洗数次，洗净残留的药液后切成小块。，然后，放入PDA 培养基的试管或培养皿上，置24 ～26℃温度下，培养5 ～ 7 天。在分离的真菌组织周围见长有白色菌丝时，应及时将菌丝移至斜面试管培养基上，再置温度24 ～26 ℃下培养7～10 天，即得纯菌种。所得的纯菌种还可继续扩大培养或保藏。
寄主分离法即从生长有某种真菌的寄主体上（如茯苓、木耳木段）取下木片，进行分离的方法。如木耳制种时，可选朵大、出耳多、质厚的耳棒（即长有木耳的木段）。采集后，削去耳根下的树皮，将其横断面锯成1 厘米厚的木片，在无菌条件下，切去无耳菌丝部分，留下有耳菌丝部分，浸入水中1 分钟，取出再用无菌水冲去木片上的液体。然后，用解剖刀将木片切成0 . 5 厘米的小块，放入斜面培养基内，置24 ～26 ℃下培养，及时淘汰杂菌，选取纯菌丝进行移植培养，即得菌种。
低温生物菌种的使用温度
普通硝化细菌在温度15°C时，活性大幅度降低，硝化速度也明显下降，温度5°C时，普通硝化细菌的生命活动几乎停止，处于休眠状态，普通中温微生物适合生长温度为25~37℃，目前污水处理厂的处理工艺大都可实现15°C左右氨氮达标排放，当温度12°C时，中温菌的活性大大降低，甚至没有繁殖功能，使得污水厂COD、氨氮和磷处理效果变差，出水无法达标排放，投加COD去除剂，氨氮去除剂，除磷剂等化学絮凝剂或氧化剂，在增加污水厂运营成本的同时，又形成了二次污染。
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