碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝1脏、骨骼、肠、shen和胎1盘等组织经肝1脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA部分片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与AKP6六种同功酶。其中第yi、2、6种均来自肝1脏,第3种来自骨细胞
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碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝1脏、骨骼、肠、shen和胎1盘等组织经肝1脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA部分片段的5’-P末端转换成5’-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与AKP6六种同功酶。其中第yi、2、6种均来自肝1脏,第3种来自骨细胞,第4种产生于胎1盘及癌细胞,而第5种则来自小1肠绒毛上皮与成纤维细胞。

碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶,即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,这类底物包括核酸、蛋白、生物1碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。碱性磷酸酶是磷酸酶的一种,磷酸酶的作用与激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子,如ATP,将磷酸基团加到对应底物分子上。碱性磷酸酶在碱性环境有zui大活力,对来源于细菌中的ALP来说,其zui适pH是8.0,而对来源于牛的ALP则是8.5。

长基因组序列、特别是包含大的基因簇的那些的克1隆对于产生medicine和生物燃料的合成生物学和基因工程工作特别重要。传统的基于PCR的克1隆方法通常受限于DNA模板的长度和GC含量:标准的PCR反应常规产生至多10 kb的片段,而更长的PCR产物需要反应条件的繁琐优化,并且甚至在理想条件下,通常受限于35 kb5。或者,可通过装配多个短片段,例如重叠PCR产物或化学合成的DNA寡聚物,产生长的目的基因组序列,但这样的方法趋于耗时和昂贵,特别是对于获得长于50 kb的序列(其通常需要3-5阶段,每个包含多个装配事件)6,7。获得长的基因组序列的另一方法是通过基因组DNA的限制性酶消化。

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