现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚
ips细胞在基质胶上培养
现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚鸟氨酸通常与层粘连蛋白结合使用, 主要限于神经元细胞。
特别说明:PHENODRIVE是一类合成的仿生细胞基质, 能够通过细胞外基质的特定生物配体, 对大多数细胞维持或影响其表型, 可用于细胞单培养或共培养。electroris静电纺丝系统主要包括ejector泵、喷丝板、集热系统和高电压电源系统等构成。PHENODRIVE是一种人工合成的、非动物源性的新型细胞、组织培养基质胶(基质凝胶),主要用于实验室内进行细胞培养、组织培养的基于科学研究的目的, 该产品目前并未作为医X用耗材或进行注册, 不得用于临床或人体, 否则产生的一切后果均由使用人员自行承担!
PHENODRIVE冻干粉末如何重组?
由于PHENODRIVE 是以无菌冻干粉末状态进行存储的, 因此在使用时需要对其进行重组。静电纺纤维除直径小之外,还具有孔径小、孔隙率高、纤维均一性好等优点,使其在气体过滤、液体过滤及个体防护等领域表现出巨大的应用潜力。实验人员可以根据需求,取适量的粉末将其溶解进水、乙醇或培养液中, 这个过程非常简单, 待其溶解后得到无色、透明液体经过滤后即可准备用于培养 , 这一过程即重组。重组后的液体可在-20℃ 的低温下保存3至少3个月。
重组温度: 室温即可;
重组环境: 推荐有紫外线照射灭菌的环境;
过滤孔径: 0.22um;
溶液要求: 用于溶解PHENODRIVE的溶液PH值建议约7.4;
重组浓度: 建议范围 0.01mg/ml ~0.1mg/ml, 通常浓度越高对于培养细胞表型的影响、控制时间越久, 0.01mg/ml的浓度影响、控制时间约3天, 而0.1mg/ml的则可以达到15天;
利用PHENODRIVE重组溶液对聚合物3D支架进行涂布:
如果采用乙醇溶液进行重组, 应确保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重组步骤, 然后用移液器移取足够的重组溶液将支架完全覆盖, 同样采用自然蒸发的方法在支架的表面及空期间形成一层透明的薄膜。
注:
1、任何的中性的水介质的溶液都可以用来对PHENODRIVE进行重组, 包括缓冲液;
2、采用乙醇的目的是利用其挥发性来缩短溶剂蒸发的时间;
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