产品效能100ng/ml HRP标记的羊抗鼠37℃孵育2周可以保持90%以上的活性,4℃贮存1年以上仍能保持良好的抗0体和酶活性,较许多市售同类产品稳定HRP效能更强。储存及运输常温运输(勿超过30℃), 2-8℃储存,在有效期内使用。产品介绍即用型,用于标记物为辣根过氧化物酶的ELISA;单一组分,超稳定,使用方便。TMB是辣根过氧化物酶(HRP)的底物,在辣根过氧化物酶的作用下
TMB显色液
产品效能
100ng/ml HRP标记的羊抗鼠37℃孵育2周可以保持90%以上的活性,4℃贮存1年以上仍能保持良好的抗0体和酶活性,较许多市售同类产品稳定HRP效能更强。
储存及运输
常温运输(勿超过30℃), 2-8℃储存,在有效期内使用。
产品介绍
即用型,用于标记物为辣根过氧化物酶的ELISA;单一组分,超稳定,使用方便。TMB是辣根过氧化物酶(HRP)的底物,在辣根过氧化物酶的作用下,与氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比,从而可以用于检测基于HRP标记物的检测。
1. 检测细胞或组织中是否含有内源性过氧化物酶的方法:将组织切片水化后,加入底物DAB,如果变为棕色,说明组织切片含有过氧化物酶,需要封闭内源性过氧化物酶活性。
2.检测细胞或组织中是否含有内源性碱性磷酸酶的方法:将组织切片水化后,加入底物BCIP/NBT,如果变为棕色,说明组织切片含有内源性碱性酶,需要封闭其活性。
3.影响过氧化物酶的分子有血红素蛋白如红细胞中的血红蛋白,肌肉细胞中的肌红蛋白,粒细胞和单核细胞中的细胞色素及肝0脏和shen脏之中的触媒。
操作步骤
石蜡切片
1. 脱蜡:二甲0苯,室温,2 次,每次 5~10min。
2. 水合 、、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸馏水,每级 3min。
3. 在洗涤缓冲液中润洗 10min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)
5. 继续通用步骤。
冰冻切片
1. 空气中干燥切片,至少 1hr
2. 用前用合适的固定液固定,如果要延长保存时间,固定后在空气中干燥 1hr。 单独包装在铝箔袋中,–70°C 干燥保存,用前从冰箱取出,室温放置至少 1hr。
3. 浸入洗涤缓冲液中 10~15min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)。

加生物素化抗0体
1. 去掉缓冲液,擦掉切片周围的液体。
2. 加生物素化抗0体,完全覆盖切片。
3. 室温孵育 30min。
4. 用洗涤液洗去抗0体,用洗涤液润洗 5min。
加亲合素-HRP
2. 加亲合素-HRP,完全覆盖切片。
4. 用洗涤缓冲液洗去亲合素-HRP,用洗涤缓冲液润洗 5min。
显色
1. 加显色液(自备)显色。
可能出现的问题和解决方法

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