现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚
基质胶浓度
现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚鸟氨酸通常与层粘连蛋白结合使用, 主要限于神经元细胞。
PHENODRIVE是一类合成的仿生细胞基质, 能够通过细胞外基质的特定生物配体, 对大多数细胞维持或影响其表型, 可用于细胞单培养或共培养。通过重组后的PHENODRIVE可以:
1 在2D培养耗材如培养板、培养皿或培养瓶的表面形成一层透明的薄膜;
2 对于悬浮细胞培养, 以通过将PHENODRIVE直接溶解在培养液中;
无论上面哪一种应用方式, 细胞均可以在较短的时间内形成类组织样结构。
PHENODRIVE 作为一款人工合成的、非动物源性的新一代细胞、组织培养用基质胶(基质凝胶),与传统的自动物体提取的基质胶相比具有哪些优势呢?这里我们做一个简单、主要的总结如下:
传统基质胶
01 基本属于动物源性的产品;
02 可能含有非预期的、有害的外来污染物;
03 现有产品使用过程相对比较复杂;
04 存在生物化学和地形特征的批次间差异;
05 存储不稳定;
06 产品单一, 无法满足用户的需求;
07 重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 不稳定且昂贵;
08 部分产品只能在低温条件下溶解,且较佳培养时间较短;
09 聚鸟氨酸通常与层粘连蛋白结合使用,主要限于神经元细胞;
合成基质胶
01 合成的非动物源性的产品;
02 所有化学成分均可控;
03 使用非常方便, 水、乙醇、培养液等均可以溶解;
04 人工合成, 化学成分稳定, 批次间一致性较好;
05 性能稳定, 低温可存储至少12个月,紫外线照射不影响;
06 产品范围较广, 可满足几乎所有已知细胞系应用需求;
07 可用于无培养;
08 适用于 2D 表面培养耗材、微孔支架以及直接加入培养液;
09 能够模仿大多数组织的细胞外基质或上皮和内皮基底膜的网状结构;
10 能够以高度受控的方式向细胞展示生物配体,无论是在间距还是密度方面;
11 能够以受控和可的方式培养细胞并保留其表型而无需更改实验方案;
12 与现有的显微镜、成像技术以及常规的染色等应用方案兼容;
13 在旋转条件下悬浮形成3D细胞结构, 或与其他生物材料结合用于3D打印;
使用PHENODRIVE重组液体对常见塑料、玻璃培养耗材表面进行涂布:
对于这类耗材表面的涂布应用, 通常建议将PHENODRIVE 冻干粉末溶解进75% 的乙醇中, 按要求的浓度进行重组, 将经过滤的重组溶液浇铸在需要涂布的器皿表面,并在无菌的环境下让其自然蒸发(建议紫外线照射的无菌环境下), 待溶剂蒸发尽后, 即在器皿表面留下一层透明的薄膜,即完成涂布的过程。静电纺丝技术已经制备了种类丰富的纳米纤维,包括有机、有机/无机复合和无机纳米纤维。
建议:在无情况下种植细胞, 待细胞粘附后再添加, 比如在细胞种植3小小时后。
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