经过了近十多年既漫长又短暂的发展,iPS细胞技术已经取得了举世瞩目的进展。一个个突破性的成果既给我们带来了喜悦,也带来了新的挑战,细胞重编程有望迎来一个新的研究浪潮。尽管iPS细胞有着诱人的应用前景,然而,未来iPS细胞的研究也面临着许多亟需解决的问题:
首先,效率问题。目前,诱导产生iPS细胞的率仍然很低,这与基因导人的方式整合位点、表观遗传学等多种因素有关。这已成
细胞凋亡检测试剂盒
经过了近十多年既漫长又短暂的发展,iPS细胞技术已经取得了举世瞩目的进展。一个个突破性的成果既给我们带来了喜悦,也带来了新的挑战,细胞重编程有望迎来一个新的研究浪潮。尽管iPS细胞有着诱人的应用前景,然而,未来iPS细胞的研究也面临着许多亟需解决的问题:
首先,效率问题。目前,诱导产生iPS细胞的率仍然很低,这与基因导人的方式整合位点、表观遗传学等多种因素有关。这已成为制约iPS从实验室走向临床的zui大瓶颈。因此,如何提高iPS细胞的制备效率仍是人们普遍关注的问题。
第二,安全性问题。现在诱导iPS细胞通常借助逆转录病毒为载体,将几种癌基因转入分化细胞诱导其成为iPS细胞,而这种方法就有可能会因为外源基因插入细胞基因组,干扰了内源基因的表达,从而诱发cancer。
2006 年时,日本京都大学山中伸弥(Shinya Yamanaka) professor的团队发现只须将四个与iPS细胞特性相关的转录因子Oct3/4、Sox2、c-Myc, 以及Klf4( 简称OSKM,也被称为「山中因子」Yamanakafactors),利用反转录病毒的方式导入小鼠皮肤纤维母细胞后,即可以促使纤维母细胞重新再编程,形成具有多能性iPS细胞的分化能力。这样的细胞, 称为「诱导式多能性iPS细胞」(iPS细胞induced pluripotent stem cells,iPSCs)。
细胞的鉴定
1. u表面标志分子鉴定iPS细胞能够表达多能iPS细胞特异的表面标志分子,如:ssea-1(阶段特异性胚胎抗原1),ssea-3等。这些物质在已分化体细胞表面不表达,从而鉴定。
2. u表观遗传状态鉴定iPS细胞与ES细胞具有相似的DNA甲1基化模式和组蛋白修饰情况。iPS细胞中的多能基因,如oct-4,Nanong等的启动子区域CpG岛从高甲1基化转变为类似ES细胞的低甲1基化状态。
3.u基因表达模式和发育潜能鉴定d. uES和iPS细胞基因表达谱基本相同。iPS细胞具有发育为三个胚层的能力,并能参与生殖系的发育,这与ES细胞相同。iPS细胞的多能基因启动子区域具有与ES细胞相同的高的H3K4Me3及低H3K27Me3水平。
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