1.人ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的antibody或抗原）与固相载体表面的抗原或antibody起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原antibody复合物与液体中的其他物质分开。
2.再加入酶标记的抗原或antibody，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
3.加入酶反应的底物后，底物
DNA标记
1.人ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的antibody或抗原）与固相载体表面的抗原或antibody起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原antibody复合物与液体中的其他物质分开。
2.再加入酶标记的抗原或antibody，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
3.加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
4.由于酶的催化效率很高，间接地放大了免1疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定antibody。
5.然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
传统小分子特异性antibody制备技术
为解决小分子这类半抗原物质无法刺激宿主动物产生antibody的特性，必须将半抗原回复完全抗原的特性。解决这个问题可以通过将小分子和对宿主动物immune原性很强的物质：如OVA、BSA、KLH等偶联，将其制备成完全抗原，通过immune宿主动物，便能促使宿主动物产生针对小分子的特异性antibody，这类antibody通过抗原特异性的筛选便能获取目的antibody。目前，通过此项技术能解决绝大多数小分子特异性antibody的制备，但是也可能由于小分子的结构特异，偶联物和偶联方式的选取、偶联率的差异以及immune技术有待发展等多方面的因素使其特异性antibody的制备存在困难。
植物ＤＮＡ的ＣＴＡＢ提取法：
1 称取新鲜叶片2-3ｇ,剪碎放入研钵中,在液氮中研磨成粉末。
2 将粉末转移到的加有7ｍｌ经预热的1 5×ＣＴＡＢ提取缓冲液15ｍｌ离心管中,迅速混匀后置于65℃水浴中,温育30ｍｉｎ。
3 取出离心管,冷却至室温,加入氯1仿/异戊1醇(24:1),充分混匀,室温下2300×ｇ离心20ｍｉｎ。
4 将上清转移至另一新的15ｍｌ离心管中,加入1/10体积10%的ＣＴＡＢ和等体积的氯1仿/异戊1醇。充分混匀,2300×ｇ离心20ｍｉｎ。
5 转移上清至另一新的15ｍｌ离心管中,加入等体积1%的ＣＴＡＢ沉淀缓冲液,轻轻摇晃至形成ＤＮＡ絮状沉淀。1000×ｇ离心10ｍｉｎ,使ＤＮＡ沉淀于管底。
6 加入1 5-2ｍｌ的1ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ及5μｌＲＮａｓｅ置于56℃水浴中过夜。待ＤＮＡ完全溶解后,加2-3ｍｌ4℃预冷的95%的冰乙醇使ＤＮＡ沉淀,挑出ＤＮＡ,置于1 5ｍｌ离心管中,用70%乙醇清洗30ｍｉｎ,用离心机甩5ｓ,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5ｍｉｎ,倒出95%乙醇,在超净工作台上吹干。
7 将风干的ＤＮＡ直接在4℃保存备用或溶于100μｌＴＥ溶液中于-20℃保存。
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