细胞复苏冻存袋
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;
3. 离心, 1000rpm,5min;
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;
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CS50冻存袋代理
细胞复苏冻存袋
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;
3. 离心, 1000rpm,5min;
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;
5. 次日更换一次培养液,继续培养。
冻存袋的应用
对于需要保存5年以上的体外细胞的方法,-196°℃的深低温液氮保存简便,实用.冻存后的细胞损伤小活力高能保障患者移植后造血功能的早期恢复,反之则导致造血功能恢复的延迟甚至失败.原有的液氮罐保存方式是将装有千细胞的冻存袋放入圆筒状的容器中后,再放入液氮罐中保存,由于冻存袋与圆筒状的容器形状尺寸的不匹配冷冻保存时会造成冻存袋的变形导致千细胞被挤压受损甚至消灭,且受液氮罐空间限制能冻存的数量有限.针对如何经济,较大容量的保存细胞.
冻存袋使用注意事项
1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致。
2. 冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二亚砜(DMSO)对细胞不是完全,在常温下,二亚砜对细胞的毒副作 较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二亚砜(DMSO)选择进口产品。
3. 离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。
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