细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。
细胞的多能性受到转录因子网
辣根过氧化酶检测
细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。
细胞的多能性受到转录因子网络和表观遗传学的复杂调控,那么,仅仅依靠导人的几个转录因子是如何完成这一复杂的任务,从而诱导出具有多能性的细胞呢深入研究体细胞重编程的分子机制,调控机制以及体外定向诱导分化机制也是未来研究的重要任务之一。
1,逆转录病毒和慢病毒载体导致tumour发生的潜在风险需要加以有效防范。
2,需要深入研究比较iPS细胞和hES细胞在细胞生物学的特性、 定向分化机制等方面是否具有显著的差异。
3,需建立一种新的方法以避免基因转染或基因转导带来的潜在风险, 如通过某些化学物品或因子唤醒体细胞中固有的上述转录因子的方式以替换外源性基因转染的方式, 或者用某些因子的短暂性表达代替永1久性导入。
iPS细胞与胚胎ES形态相似、核型、端粒酶活性、体外分化潜能均相同,同时也能够表达相同的表面标志分子。ES细胞和IPS细胞具有相同的基因。不同的是,ES细胞中的与细胞多能性有关的基因能够表达,如:oct4,Sox2等。而已分化的体细胞中的这些基因不能表达。通过导入与多能性有关的外源基因来唤醒体细胞中的多能性基因,从而使体细胞从分化状态重编程为多能性iPS细胞。

细胞(Cells)是由英国科学家罗伯特·胡克(Robert Hooke,1635~1703)于1665年发现的。当时他用自制的光学显微镜观察软木塞的薄切片,放大后发现一格一格的小空间, [1] 就以英文的cell命名之,而这个英文单字的意义本身就有小房间一格一格的用法,所以并非另创的字汇。而这样观察到的细胞早已,仅能看到残存的植物细胞壁 [2] ,虽然他并非真的看见一个生命的单位(因为无生命迹象),后世的科学家仍认为其功不可没,一般而言还是将他当作发现细胞的人。而事实上真正首先发现的,还是荷兰生物学家列文虎克。

(作者: 来源:)