器材(1) 聚塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。试验原理试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗
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器材(1) 聚塑料板(简称酶标板)40孔或96孔,ELISA检测仪,50μl及100μl加样器,塑料滴头,小毛巾,洗涤瓶。(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。试验原理试剂盒是固相夹心法酶联吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。
洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

使用研磨棒进行匀浆时:① 取1~100 mg的动物组织或人组织移入冰浴预冷的Collection Tube 中,用研磨棒研磨成糊状。② 加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒研磨成匀浆。③ 加入350 μl的Solution A将研磨棒上的匀浆冲入Collection Tube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。【从植物材料或植物培养细胞中提取基因组DNA】① 按下表称取适量的新鲜植物材料(如选用的是冷冻干燥植物材料,则用量减半),剪成小块放入研钵中,加入液氮,待样品冷冻完全后、用力研磨至粉末状。

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