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1.建议提供目的蛋白阳性表达样品(纯蛋白、有阳性表达的细胞或组织、商品化的阳性对照产品等)作为阳性对照
2.免费内参检测为:beta-actin,beta-tubulin,GAPDH,Histone H3, Lamin B1等
3.如需进一步数据分
HRP-小鼠抗大鼠IgG2b *
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2.免费内参检测为:beta-actin,beta-tubulin,GAPDH,Histone H3, Lamin B1等
3.如需进一步数据分析:TotalLab Quant专0业软件读取IOD值、条带的Normalization处理、以及发表论0文时所用条带的处理,请另询价
4.对条带结果有特殊要求,请另询价
5.双方签订合同后,收取70%首付后启动预实验
6.WB特殊要求请咨询
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic streaming和cytokinesis等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血0清。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin; 其余两种广泛分布于各种组织中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之间同源性大于90%,但在N-terminal同源性仅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。
水佐剂免0疫步骤
步骤一:用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
步骤二:充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
步骤三:通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠,每只小鼠100μl。备注:本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象,抽入针管前应充分混匀,抽入针管后应尽快注射。
步骤四:第21天按同样方式加强免0疫一针。备注:每次佐剂和抗原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定,抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内, 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注:若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求,可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
1937年,有人用电泳法将人的蛋白分为白蛋白、甲种球蛋白、乙种球蛋白和丙种球蛋白,不久又证明了抗0体存在于丙种球蛋白中,长期以来丙种球蛋白就成为抗0体的代名词。但以后又发现部分乙种球蛋白亦具有抗0体功能。因此,把具有抗0体活性及抗0体分子相关的球蛋白,统称为球蛋白。1964年在日内瓦召开的人类球蛋白命名会议上,把抗0体统一命名为球蛋白G、球蛋白A、球蛋白M,以后又发现了球蛋白D和球蛋白E,共有五类球蛋白,而每一类球蛋白又有许多亚型。
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