拉曼光谱在生物学研究中的应用
拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段,由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单,故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。
生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多宝贵的信息:
(1)蛋白质二级结构:α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转
(2)蛋白质主链构像:酰胺Ⅰ、Ⅲ,C-C、C-N伸缩振动
(3)蛋白质
智能拉曼光谱仪
拉曼光谱在生物学研究中的应用
拉曼光谱是研究生物大分子的有力手段,由于水的拉曼光谱很弱、谱图又很简单,故拉曼光谱可以在接近自然状态、活性状态下来研究生物大分子的结构及其变化。
生物大分子的拉曼光谱可以同时得到许多宝贵的信息:
(1)蛋白质二级结构:α-螺旋、β-折叠、无规卷曲及β-回转
(2)蛋白质主链构像:酰胺Ⅰ、Ⅲ,C-C、C-N伸缩振动
(3)蛋白质侧链构像:苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的侧链和后二者的构像及存在形式随其微环境的变化
(4)对构像变化敏感的羧基、巯基、S-S、C-S构像变化
(5)生物膜的脂肪酸碳氢链旋转异构现象。
(6)DNA分子结构以及和DNA与其他分子间的作用。
(7)研究脂类和生物膜的相互作用、结构、组分等。
(8)对生物膜中蛋白质与脂质相互作用提供重要信息。
拉曼光谱仪不工作怎么办
1、检查仪器和所有附件插座都插好并接通电源
保证拉曼光谱仪电源(如果附带电源)都插好并接通,由于激光器有不同种类,可参照每个激光器的说明书获取进一步的帮助,在有两个或多个激光器的拉曼光谱仪系统中,确保联锁系统设置在正确的位置上,正确的激光器被接通。
2、检查仪器的外罩处于安全的关闭状态,联锁装置正在运转
如果以上操作都已经检查过,就可以准备进行光谱测试。将样品放置在显微镜下,启动的拉曼光谱仪操作软件,如果仍不能得到光谱,检查其它选项。保证样品被正确地放置在显微镜下,即样品被准确地聚焦并照射在样品正确的位置上,测量时需改变不同的测试区域以避免因样品不纯带来一些非期望结果。
3、检查所有软件窗口的设置是否正确
检查拉曼光谱仪成像区域,设置窗口的数值并保证激光像点处于该区域的中心。标准成像区域应该是激光像点中心垂直方向,检查狭缝的设置,当进行标准操作时狭缝应为固定的μm数值,如果CCD探测器饱和,将得不到任何有用的信息,可采用降低激发光功率或提高仪器的共焦程度来于以避免。
浅谈拉曼光谱仪
拉曼光谱仪,顾名思义,就是用来测量拉曼光谱的仪器。通常情况下,拉曼光谱仪由以下几个部分组成:
激发光源
现有的拉曼光谱仪,基本都采用激光作为激发光源,激光波长的选择从紫外、可见到近红外均有,常见的有532nm、785nm。激光波长的选择会影响拉曼光谱仪的灵敏度以及空间分辨率。
光学系统
根据拉曼光谱仪的设计,该部分可以是一个成熟的拉曼探头,也可以是自己搭建的由滤光片、二向色镜等光学元件组成的光学系统。光学元件的选择以及光路设计都将影响到拉曼光谱仪的灵敏度。
分光仪
根据分光形式的不同,拉曼光谱仪可以分为以下三种类型:
1、 滤光片型拉曼光谱仪,这种类型的拉曼光谱仪只有很狭窄的光谱段进入探测器,这就意味着绝大部分拉曼散射光会被浪费掉。
2、 分光仪型拉曼光谱仪,通过衍射光栅分光,将衍射光聚焦在光谱仪的输出面上,许多集成式的拉曼光谱仪会直接使用成熟的小型光谱仪来起到分光的作用。
3、 迈克尔逊干涉仪型拉曼光谱仪。来自试样的拉曼散射光通过干涉仪进入探测器,获得干涉图谱,随后进行傅里叶变换得到拉曼光谱。
探测器
拉曼光谱仪一般选用CCD作为探测器,CCD探测器是一种硅基多通道阵列探测器,可以探测紫外、可见和近红外光。因为它是高感光度半导体器件,适合分析微弱的拉曼信号,再加之CCD探测器允许进行多通道操作,可以在一次采集中探测到整段光谱,所以很适合用来检测拉曼信号。
计算机处理系统
除了仪器控制与数据采集外,丰富的样品数据库与准确的分析算法是目前拉曼光谱仪配套软件关注的重点。
拉曼光谱仪的基本原理和组成介绍
拉曼光谱仪的应用非常广泛,在物理、化学、材料等很多领域均有应用。随着拉曼技术的不断发展,相信以后的应用会更加普遍。本文主要跟大家介绍一下拉曼光谱仪的基本原理和组成。
拉曼光谱仪的原理非常简单,当光打到样品上时候,样品分子会使入射光发生散射。大部分散射的光频率没变,我们这种散射称为瑞利散射,部分散射光的频率变了,称为拉曼散射。散射光与入射光之间的频率差称为拉曼位移。
拉曼光谱仪主要就是通过拉曼位移来确定物质的分子结