DNA连接酶与DNA聚合酶用途不同
DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆1菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。
DNA聚合酶在DNA copy中起做用，主要是连接DNA部分片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
长基因组序列、特别是包含大
蛋白酶Ｋ
DNA连接酶与DNA聚合酶用途不同
DNA连接酶主要用于基因工程，将由限制性核酸内切酶“剪”出的粘性末端重新组合，故也称“基因针线”。如基因工程中，大肠杆1菌连接酶连接黏性末端，T4连接酶既可连接黏性末端，又可连接平末端。
DNA聚合酶在DNA copy中起做用，主要是连接DNA部分片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。
长基因组序列、特别是包含大的基因簇的那些的克1隆对于产生medicine和生物燃料的合成生物学和基因工程工作特别重要。传统的基于PCR的克1隆方法通常受限于DNA模板的长度和GC含量：标准的PCR反应常规产生至多10 kb的片段，而更长的PCR产物需要反应条件的繁琐优化，并且甚至在理想条件下，通常受限于35 kb5。或者，可通过装配多个短片段，例如重叠PCR产物或化学合成的DNA寡聚物，产生长的目的基因组序列，但这样的方法趋于耗时和昂贵，特别是对于获得长于50 kb的序列(其通常需要3-5阶段，每个包含多个装配事件)6,7。获得长的基因组序列的另一方法是通过基因组DNA的限制性酶消化。
cDNA是指具有与某RNA链呈互补碱基序列的DNA。与RNA链互补的单链DNA，以其RNA为模板，在适当引物的存在下，由依赖RNA的DNA聚合酶（反转录酶）作用而合成，并且在合成单链cDNA后，再用碱处理除去与其对应的RNA以后，以单链cDNA为模板，由依赖DNA的DNA聚合酶或依赖RNA的DNA聚合酶作用合成双链cDNA。在这种情况下，mRNA的cDNA，与原来的基因组DNA相同而且无内含子；相反地，对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3'末端的poly A序列等的核苷序列上，与外显子序列、先导序列以及后续序列等一起反映出mRNA结构。
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