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液相色谱仪与气相色谱区别
液相色谱仪在基本原理上和气相色谱仪是一致的,所以设备的基础原理差不多,但是他们在检测方面是有不相同的地方的,有不相同的,但又有不同之处:液相色谱 与气相色谱的主要区别可归结于以下几点:
1、进样方式的不同:液相色谱仪只要将样品制成溶液,而气相色谱需加热气化或裂解
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液相色谱仪与气相色谱区别
液相色谱仪在基本原理上和气相色谱仪是一致的,所以设备的基础原理差不多,但是他们在检测方面是有不相同的地方的,有不相同的,但又有不同之处:液相色谱 与气相色谱的主要区别可归结于以下几点:
1、进样方式的不同:液相色谱仪只要将样品制成溶液,而气相色谱需加热气化或裂解;2、流动相的不同,在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一定的相互作用力;
3、由于液体的粘度较气体大两个数量级,使被测组分在液体流动相中的扩散系数比在气体流动相中约小4~5个数量级;
4、由于流动相的化学成分可进行广泛选择,并可配置成二元或多元体系,满足梯度洗脱的需要,因而提高了液相色谱的分辨率(柱效能);
5、液相色谱采用5~10Lm细颗粒固定相,使流体相在色谱柱上渗透性大大缩小,流动阻力增大,必须借助高压泵输送流动相;
6、液相色谱仪是在液相中进行,对被测组分的检测,通常采用灵敏的湿法光度检测器,例如,紫外光度检测器、示差折光检测器 、荧光光度检测器等;
7、液相色谱与气相色谱相比较,液相色谱同样具有高灵敏度、能和高速度的特点。
8、液相色谱的定性和定量分析,与气相色谱分析相似,在定性分析中,采用保留值定性,或与其他定强的仪器分析 法连用;在定量分析中,采用测量峰面积的化法、内标法或外标法等,但液相色谱在分离复杂组分式样时,有些组分常不能出峰,因此化法定量受到限制,而内标法定量则被广泛使用。
液相色谱柱的再生
因为,色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说是柱效的下降。
1.反向柱的再生:
2.正相柱的再生:
3.离子交换柱的再生:
长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。
液相色谱柱性能评价
无论是自己装填的还是购买的色谱柱,使用前都要对其性能进行考察,使用期间或放置一段时间后也要重新检查。柱性能指标包括在一定实验条件下(样品、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性,或分离度。一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。进行柱效比较时,还要注意柱外效应是否有变化。
一份合格的色谱柱评价报告应给出柱的基本参数,如柱长、内径、填料的种类、粒度、色谱柱的柱效、不对称度和柱压降等。
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