组成编辑完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或的固相载体(吸附剂);(2)酶标记的抗原或(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制(定量测定中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及
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组成编辑完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:(1)已包被抗原或的固相载体(吸附剂);(2)酶标记的抗原或(结合物);(3)酶的底物;(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制(定量测定中);(5)结合物及标本的稀释液;(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度按加量及比色液的终体积而异,在板式ELISA中一般采用3mol/L。
终止液(3M H2SO4):蒸馏水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物缓冲液(PH5.0磷酸枣柠檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M柠檬酸(19.2克/L) 24.3ml加蒸馏水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml无水乙醇)0.5ml底物缓冲液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物缓冲液(PH5.5) 1ml3%H2O2 2μl(8) 抗原、和酶标记。(9) 正常人和阳性对照。
安全性1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。4. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

蛋白质包被的适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。酶标记工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

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